透明颤菌血红蛋白基因在短小芽孢杆菌中的表达
血红蛋白基因能能使低氧条件下细胞的生长和蛋白质的合成速度不会受到太大的影响,并且在一定条件下还能促进目的基因的表达。本研究将透明颤菌血红蛋白基因成熟肽编码区序列分别与枯草芽孢杆菌的P43双启动子和短小芽孢杆菌碱性蛋白酶启动子wBp连接,重组成融合基因,然后利用大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pSUGv4分别构建组成型表达质粒pSUP43vgb和pSUwBpvgb。将表达质粒分别转化短小芽孢杆菌Bacillus pumilus UN-31-C-11、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600和大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),经SDS-PAGE和CO差异光谱检测表明融合基因在3种宿主菌中均得到了表达。融合基因的表达使宿主菌模拟通氧充分或者低氧培养条件下均表现出相对于对照菌株的生长优势。在短小芽孢杆菌中,表达质粒使重组菌株在低氧条件下的生长量在生长后期超对照菌株20%以上,而且血红蛋白的表达促进了短小芽孢杆菌蛋白酶基因的表达和分泌,碱性蛋白酶的产量高于对照30%以上。结果还显示,基因启动子P43比wBp对融合基因在短小芽孢杆菌中的表达有更好的启动效果。
透明颤菌;血红蛋白基因;短小芽孢杆菌;穿梭载体;启动子;基因表达;基因融合
四川大学
硕士
遗传学
张义正
2006
中文
Q784
64
2008-06-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)