奥曲肽抑制小鼠虹膜新生血管形成的实验研究
第一部分建立高氧诱导C57BL/6J鼠虹膜新生血管模型
目的：建立可进行定量研究的小鼠虹膜新生血管模型，为虹膜新生血管相关疾病的机制及药物干预研究提供稳定的动物模型。
方法：75％高氧环境下饲养新生7d的20只C57BL/6J小鼠，持续5d后返回正常空气环境中，另一组20只同龄幼鼠置于正常空气环境中饲养作为对照，鼠龄17d时处死幼鼠，取眼球固定、包埋、切片，光学显微镜下观察虹膜组织形态结构和新生血管数和形态，于透射式电子显微镜下观察新生血管内皮细胞超微结构形态，并组织切片做血管内皮生长因子(VEGF)免疫组织化学染色，观察并比较两组虹膜组织VEGF蛋白的表达。
结果：与正常组比较，高氧组小鼠虹膜基质和边缘层新生血管数增多，血管内皮细胞增生，管腔扩张；前表面可见新生血管形成、纤维血管膜和血管膜。电镜下见高氧组虹膜基质厚壁血管的内皮细胞伸出较多的基底胞突，其顶部基膜断裂内皮细胞以血管芽方式迁入并穿出胶原纤维厚壁，在厚壁的外侧形成小的新生血管；面向前房的血管外侧壁常见为内皮细胞的菲薄有孔的胞质突部分的纤维血管膜，而内侧壁多为内皮细胞的有核部分，壁厚无孔，血管内外侧壁厚薄不对称；可见血管内皮细胞呈扁平梭状，核呈椭圆形，胞质丰富，高尔基体发达，有中等量线粒体和粗面内质网，小泡较多的血管膜。高氧组虹膜组织切片VEGF表达较正常组明显，两组相比差别有显著统计学意义(P<0.01)。
结论：该小鼠模型中虹膜新生血管的发生与眼内组织相对缺血、缺氧有关，模型具有廉价，可重复性强和可定量研究等优点，是进行虹膜新生血管发生机制及药物干预研究的合适模型。
第二部分奥曲肽抑制小鼠虹膜新生血管形成的实验研究
目的：观察奥曲肽对高氧诱导小鼠虹膜新生血管形成的抑制作用，并探讨其作用机制；探讨虹膜新生血管及新生血管性青光眼的发病机制，为临床治疗虹膜新生血管和新生血管性青光眼提供新的思路和方法。
方法：以高氧诱导7日龄C57BL/6J幼鼠建立虹膜新生血管动物模型。两治疗组分别腹腔注射奥曲肽50μg/kg和100μg/kg，每日2次共5d；对照组腹腔注射等量平衡盐溶液。鼠龄17d时处死幼鼠，取眼球固定、包埋、切片。在光学显微镜下观察并比较各组虹膜组织形态结构和新生血管数及其形态，于透射式电子显微镜下观察并比较实验组和对照组新生血管内皮细胞超微结构形态改变；用组织切片观察并计数虹膜新生血管数目；免疫组织化学检测小鼠虹膜VEGF和MMP-2蛋白的表达，RT-PCR半定量检测VEGF mRNA在虹膜组织中的表达，以观察奥曲肽对虹膜新生血管形成的抑制作用。
结果：观察虹膜组织切片可见治疗组虹膜血管密度降低，新生血管数减少；电镜下治疗组血管壁较薄，胞质和细胞器明显减少，高剂量治疗组可见细胞调亡现象；组织切片HE染色可见治疗组虹膜基质内和前缘层及虹膜前表面新生血管数目较对照组明显减少；治疗组虹膜VEGF和MMP-2表达较对照组明显减少，差异有显著统计学意义；RT-PCR半定量检测VEGF mRNA在虹膜组织中的表达治疗组明显下调，与对照组相比差异有统计学意义。
结论：高氧诱导C57BL/6J幼鼠建立虹膜新生血管动物模型成功，是药物干预研究的合适模型；奥曲肽可以有效抑制虹膜新生血管形成，可能成为治疗虹膜新生血管和新生血管性青光眼有前景的药物。
高氧诱导虹膜病变;奥曲肽;虹膜新生血管;新生血管性青光眼;糖尿病视网膜病变;血管生成抑制剂;药物干预
重庆医科大学
硕士
眼科学
刘苏
2007
中文
R773.1;R965.3
66
2008-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）