瑞香狼毒总黄酮的微波辅助萃取及体外抗肿瘤活性
目的：本课题以乙醇为溶剂，研究微波辅助萃取瑞香狼毒总黄酮(SCTF)的最佳工艺条件；分离纯化得到有效单体，光谱鉴定确定结构类型；研究有效单体的体外抗肿瘤活性。
方法：
1.SCTF的提取、分离、纯化：以乙醇为溶剂，先用传统中药提取分离方法(索氏提取法)提取瑞香狼毒总黄酮，再依次上聚酰胺柱，大孔吸附树脂柱和硅胶柱纯化黄酮类化合物。
2.微波辅助萃取正交试验设计：首先对固液比(A)、溶剂浓度(B)、微波辐射时间(C)、微波辐射功率(D)四个单因素对SCTF提取率的影响进行实验，在此基础上设计L<,9>(3<'4>)正交实验组合表，用岛津-2550型紫外一可见分光光度计，在黄酮的最佳吸收波长298nm处测定吸光度，由回归方程算出的总黄酮浓度为指标，来研究微波辅助萃取SCTF的最佳工艺条件。
3.纯化得到的SCTF分别作<'1>HNMR、<'13>CNMR和MS鉴定。
4.体外抗肿瘤实验：SCTF以0.063.1.000μg/ml浓度处理人宫颈癌细胞Hela和结肠腺癌细胞SW480，以自动酶标仪检测细胞MTT转化率，以肿瘤抑制率为指标考察其抗肿瘤药理活性。
结果：
1.SCTF化合物纯度接近95％，经定性分析和波谱解析确定为双黄酮类化合物。可作为总黄酮定量分析的对照品。
2.微波提取优化工艺条件为：B<,3>C<,3> A<,2>D<,3>,即溶剂浓度为90％，辐射时间为60秒，固液比为1：15，微波功率为900W时，总黄酮提取率比较理想。其中溶剂浓度对总黄酮提取率有显著性影响(P<0.05)。微波辅助萃取总黄酮的相对提取率为56.79％～100.41％。
3.SCTF在0.063-1.000μg/ml药物浓度范围对人宫颈癌细胞Hela和结肠腺癌细胞SW480的MTT甲臜的形成均有抑制作用，抑制率分别为9.11％-72.59％，6.32％-63.01％。
结论：本试验将常压微波醇提取技术首次应用于SCTF成分的提取，并与常规提取方法作了比较。结果表明，以乙醇为溶剂的常压微波提取SCTF成分的提取方法省时，并具有较高产率、安全、节约能源，符合绿色环保要求，设备简单的优点。正交试验优化的提取工艺条件为B<,3>C<,3>A<,2>D<,3>.MTT法检测结果表明：SCTF对人宫颈癌细胞Hela和人结肠腺癌细胞SW480都具有较好的抗肿瘤作用，存在进一步分离筛选和结构修饰的价值。
瑞香狼毒;总黄酮;微波辅助萃取;抗肿瘤作用
遵义医学院
硕士
药理学
颉江敏
2007
中文
R284.2;R285
62
2007-12-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）