单核苷酸多态性核酸试纸条检测技术的建立
目的：应用核酸试纸条，建立一种能对单核苷酸多态性和单碱基突变进行快速检测方法。
方法：本文介绍了一种结合核酸检测试纸条(Nucleic Acid Strip，NAS)，聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)和连接酶检测反应(Ligase Detection Reaction，LDR)技术而建立的一种能快速准确检测单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms，SNP)和单碱基突变的方法，即单核苷酸多态性核酸试纸条检测技术(Single NucleotidePolymorphisms Nucleotide Strip-test，SNP-NST)。SNP-NST主要分为三个步骤：通过PCR扩增包含SNP位点/单碱基突变的基因序列；用两条特异性连接探针与扩增产物进行退火结合，并在Taq DNA ligase的作用下进行连接反应；对连接产物进行变性后用NAS进行检测，只有由两条探针连接在一起的产物才能在NAS上显示出红色的条带。我们对SNP-NST的每个步骤进行了优化。
结果：以SNP-NAS技术对50例乙型肝炎患者拉米夫定耐药进行检测，并将检测结果与DNA测序和PCR-RFLP检测进行对比，符合率分别为90％和94％。
结论：本文将PCR，IDR和NAS有机地结合在一起，建立了一种快速检测SNP和单碱基突变的方法——SNP-NAS。实验结果表明本方法不仅有很高的特异性和灵敏度，而且操作简便、快速，适合于各级医院尤其是中小型医院对SNP和单碱基突变的筛查。
单核苷酸多态性;单碱基突变;核酸试纸条;拉米夫定;快速检测方法
佳木斯大学
硕士
遗传学
吕学诜;尤其敏
2007
中文
R446
52
2007-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）