脑微血管内皮细胞对神经干细胞分化与凋亡的影响
目的：观察不同比例的脑微血管内皮细胞(vascular endothelial cell，VEC)对体外培养的神经干细胞(Neural stem cells，NSCs)分化与凋亡的影响。
方法：采用机械方法，从新生大鼠脑组织中分离神经干细胞及脑微血管内皮细胞进行培养。传二代后对NSCs进行Nestin免疫组化染色鉴定，用Ⅷ因子相关抗原对VEC进行免疫组化鉴定。然后进行VEC与NSCs共同培养，在普通培养板中VEC与NSCs接种比例分别为：1：100、1：10、1：1、10：1、100：1，各组按常规细胞培养方法进行换液、传代分瓶、细胞计数。隔马在倒置显微镜下进行细胞形态学观察，共培养14天后采用免疫组化方法及免疫荧光技术观察NSC分化及凋亡情况。以微管相关蛋白(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及caspas分别作为神经元、星形胶质细胞与凋亡的标志。以1 00倍视野倒置显微镜对免疫组化染色的NSC进行计数(每视野面积为0.196mm作为计数面积)。每组细胞均进行6孔NSC的培养，每孔随机选4个视野计数MAP-2、GFAP及caspas阳性细胞数。
结果：脑微血管内皮细胞与神经干细胞共培养神经干细胞定向分化为神经元的数量明显高于对照组(P<0.05)；定向分化为星形胶质细胞的数量显著低于对照组(P<0.05)；且脑微血管内皮细胞与神经干细胞以1：10比例共培养时最为显著(P<0.05)；神经干细胞凋亡数显著低于对照组(P<0.05)，但各共培养组间无显著差异(P>0.05)。
结论：研究结果表明脑微血管内皮细胞能够促进神经干细胞定向分化为神经元，抑制神经干细胞神经干细胞定向分化为星形胶质细胞；减少神经干细胞的凋亡数。
神经病学;神经干细胞;脑微血管内皮细胞;细胞凋亡;细胞分化
佳木斯大学
硕士
神经病学
张晓梅;朱晓峰
2007
中文
R741
38
2007-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）