怀地黄脱毒快繁及应用技术研究
本文对怀地黄的脱毒快繁及其应用技术进行了系统的研究。结果表明：(1)适宜的脱毒培养方式是切离0.2～0.5mm大小的茎尖，置于MS+6.BA 0.5或MS+KT 0.5培养基上培养，待长成苗后，37℃热处理6周，然后二次切离茎尖(0.2～0.5mm)，培养成苗。成苗率达75％，脱毒率达96～100％。(2)快速繁殖最适宜的培养基是MS+BA 0.2+NAA0.002～0.02，放置于500ml罐头瓶中进行固体培养。(3)用罐头瓶代替三角瓶，1/2MS基本培养基代替MS基本培养基，白砂糖代替蔗糖，蘑菇袋代替封口膜，可大大降低试管苗的生产成本。(4)在脱毒苗壮苗生根时，采用1/2MS+PP<,333> 0.5，加入3％的白砂糖进行培养，其壮苗生根效果最好；移栽时苗根系发达，叶色浓绿，茎杆粗壮，移栽成活率达100％。移栽基质蛭石好于珍珠岩，在室外炼苗效果好于室内，其移栽成活率可达97.89％。(5)脱毒苗的大田产量明显提高，比大田种植苗增产103.57％。(6)病毒检测：①指示植物法检测病毒，接种一个月后表现出典型症状；②电镜法检测，观察到了CMV，呈典型球状，直径约30nm；③RT-PCR法检测CMV和TMV，分别扩增出了预期特异性片断300bp和280bp；④IC-RT-PCR法检测TMV，也扩增出了预期片段(280bp)，经测序检验，氨基酸同源性达96.7％。共检测株系42株，其中有18株脱去了病毒。本试验建立了一整套怀地黄脱毒快繁及病毒检测体系，获得了脱毒苗并提高了大田产量，为怀地黄脱毒苗的工厂化生产提供了技术支持。
怀地黄;脱毒快繁;壮苗生根;病毒检测;脱毒苗;工厂化生产
河南师范大学
硕士
植物学
李明军
2007
中文
S567
82
2007-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）