系统性红斑狼疮相关基因的致病机理研究
目的：系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus,SLE)是一种病因复杂、并能累积多器官的系统性自身免疫疾病，其发病与Ⅰ型干扰素（Interferon,IFN)通路过度活化关系密切。本研究意在探讨在SLE患者外周血以及狼疮肾炎肾脏中嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phos-phorylasc，PNP),普列克底物蛋白同源域F家族成员2(pleckstrin homology domain containing family F member 2，PLEKHF2)和锚定蛋白结构域44(ankyrin repeat domain44,ANKRD44)三个SLE相关易感基因的表达情况及其与IFN积分的相关性，并进一步探讨ANKRD44在干扰素通路中调控的分子机制。 方法：收集诊断明确的42例系统性红斑狼疮患患者和48例正常对照者外周血以及12例狼疮肾炎患者肾穿样本和10例肾癌患者癌旁正常肾脏样本，釆用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)技术检测PNP、PLEKHF2和ANKRD44的表达，并分析它们与SLE临床特征和IFN积分的相关性。并挑选了基因ANKRD44做了进一步的深入研究，检测了在Raw264.7细胞在IFN-α刺激之后的表达动力学，并在Raw264.7细胞中转染了针对ANKRD44的siRNA,用Real-timc PCR检测干扰素诱导基因(IFN-inducible genes,IFIG)的表达，并用蛋白免疫印迹western blotting的方法检测干扰素下游通路的激活情况。 结果：与正常人的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)相比，狼疮病人PBMC中PNP、PLEKHF2和ANKRD44的表达水平都显著性降低。同时与正常肾脏组织相比，狼疮肾炎肾脏中PNP和ANKRD44表达水平显著性降低，而PLEKHF2表达水平上调。通过干扰素积分相关性分析，我们发现，狼疮肾炎患者肾脏PNP的表达水平与干扰素积分成负相关，而狼疮PBMC样本中ANKRD44的表达水平也与干扰素积分负相关。这提示,PNP和ANKRD44可能参与Ⅰ型干扰素通路的调节。进一步对ANKRD44的功能研究发现，ANKRD44本身就能被IFN-α下调，并且能够抑制干扰素下游信号通路和干扰素诱导基因的表达。 结论：狼疮患者中异常表达的PNP，并与IFN-α相关，可以作为检测SLE的一种新的生物分子标记物；另外，狼疮患者中异常表达的ANKRD44，与IFN-α相关，受IFN-α调控，并能参与负调控IFN下游通路，提示ANKRD44可以作为一个新的药物干预候选靶点。
系统性红斑狼疮;致病机理;基因表达
上海交通大学
硕士
基础医学
李宁丽
2015
中文
R593.241
72
2017-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）