TGF-β、IL-6、IL-17在子宫内膜异位症中的表达及相关性
目的：通过检测IL-6、IL-17和TGF-β在子宫内膜异位症（Endometriosis，EMs）患者的异位内膜组织、在位内膜组织及腹腔液中的表达情况，探讨它们与子宫内膜异位症发生、发展可能存在的关系及可能的机制，为进一步研究子宫内膜异位症的发病机理、发生和发展提供新的研究基础和理论依据，以期为子宫内膜异位症的临床治疗提供更多的指导。 方法：1收集唐山市妇幼保健医院妇产科2011年9月至2013年9月收治的因“巧克力囊肿”行普通开腹手术或宫腹腔镜手术的子宫内膜异位症患者的异位内膜、在位内膜及腹腔液50例，排除同时合并子宫腺肌症和子宫肌瘤者，同时刮取在位内膜及异位内膜，其中增生期23例，分泌期27例，年龄(34.0±2.67)岁，按照美国生育协会（AFS）提出的修正标准分期法，均为Ⅲ、Ⅳ期。选取同期在唐山市妇幼保健院妇产科因子宫肌瘤入院治疗，刮取的正常子宫内膜及抽取的腹腔液47例，（21-46）周岁，平均年龄（33.4±8.05）周岁，做为对照组进行分组研究。2 PCR法测定TGF-β、IL-6、IL-17的基因表达。3采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定腹腔液中TGF-β、IL-6、IL-17的浓度。4采用免疫组织化学法测定病理组织中TGF-β、IL-6、IL-17蛋白的定位、定量。5采用Western blot法测定病理组织中 TGF-β、IL-6、IL-17蛋白的表达。6统计学处理：本课题采用SPSS17.0统计软件对数据进行统计学处理，计量资料以均数±标准误（?x±SEM）表示，组间比较采用LSD检验，多组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05认为有统计学意义。 结果：1 Real-time PCR检测结果：1）TGF-β1基因增生期异位内膜和在位内膜TGF-β1 mRNA分别为对照组的4.67倍和2.59倍，组间比较差异均有统计学意义；分泌期异位内膜和在位内膜TGF-β1 mRNA分别为对照组的3.82倍和2.03倍，组间比较差异均有统计学意义。2）IL-6基因增生期异位内膜和在位内膜IL-6 mRNA分别为对照组的4.05倍和1.42倍，异位内膜与在位内膜及对照组之间差异均有统计学意义，而在位内膜与对照组之间差异无统计学意义；分泌期异位内膜和在位内膜IL-6 mRNA分别为对照组的4.21倍和1.83倍，组间比较差异均有统计学意义。3）IL-17基因增生期异位内膜和在位内膜IL-17 mRNA分别为对照组的3.7倍和2.9倍，异位内膜与在位内膜及对照组之间差异均有统计学意义，而在位内膜与对照组之间差异无统计学意义；分泌期异位内膜和在位内膜IL-17 mRNA分别为对照组的5.4倍和3.3倍，组间比较差异均有统计学意义。2双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定结果显示：子宫内膜异位症内膜组织中TGF-β、IL-6及IL-17增生期水平为分别为（713.37±50.61、462.45±56.43、554.02±43.58） ng/L，分泌期水平分别为（804.35±83.26、522.11±76.54、523.37±50.55）ng/L，对照组内膜组织中TGF-β、IL-6及IL-17增生期水平分别为（220.25±35.84、180.53±32.19、160.29±32.49） ng/L，分泌期水平分别为（393.27±66.63、307.59±70.61、281.86±39.32）ng/L。两组比较，子宫内膜异位症组中TGF-β、IL-6及IL-17均水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。3免疫组织化学检测结果显示：1） TGF-β在异位内膜组织增生期、分泌期结果分别为（0.61±0.046、0.697±0.086），在位内膜组织增生期、分泌期结果分别为（0.535±0.027、0.573±0.051），对照组增生期分泌期结果分别为（0.015±0.064、0.42±0.07）。结果显示异位内膜表达明显高于在位内膜及对照组内膜，差异有统计学意义（P＜0.05），TGF-β在在位内膜的表达明显高于对照组正常内膜，但差异无统计学意义（P＞0.05）。2） IL-6在异位内膜在异位内膜组织增生期、分泌期结果分别为（0.489±0.036、0.563±0.075），在位内膜组织增生期、分泌期结果分别为（0.446±0.023、0.517±0.061），对照组增生期分泌期结果分别为（0.12±0.034、0.138±0.047）。结果显示异位内膜组织表达水平明显高于在位内膜对照组正常内膜，差异有统计学意义（P＜0.05），IL-6在在位内膜的表达也高于对照组正常内膜，但差异无统计学意义（P＞0.05）。4 Western blot检测结果显示：异位内膜内膜组织中 TGF-β、IL-6、IL-17增生期蛋白表达结果为（0.898±0.106、0.448±0.038、1.01±0.055），异位内膜内膜组织中TGF-β、IL-6、IL-17分泌期蛋白表达结果为（1.035±0.099、0.512±0.042、0.993±0.043），在位内膜内膜组织中TGF-β、IL-6、IL-17增生期蛋白表达结果为（0.425±0.056、0.334±0.056、0.306±0.016），在位内膜内膜组织中TGF-β、IL-6、IL-17分泌期蛋白表达结果为（0.397±0.062、0.375±0.033、0.289±0.013），对照组内膜组织中TGF-β、IL-6、IL-17增生期蛋白表达结果为（0.102±0.013、0.116±0.017、0.091±0.007），对照组内膜组织中 TGF-β、IL-6、IL-17分泌期蛋白表达结果为（0.213±0.027、0.124±0.021、0.087±0.011）。结果显示异位内膜组织中蛋白表达明显高于在位内膜组织及对照组内膜组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。TGF-β、IL-6和IL-17在在位内膜的蛋白表达量也高于正常内膜蛋白表达量，但差异无统计学意义（P＞0.05）。5. TGF-β、IL-6和IL-17相关性分析结果显示：异位内膜增生期IL-6、IL-17蛋白表达与TGF-β表达呈现正相关（r=0.478、0.357，P＜0.05）；异位内分泌期 IL-6、IL-17蛋白表达与 TGF-β表达也呈现正相关（r=0.637、0.745，P＜0.01）。 结论：1 IL-6、IL-17和TGF-β在子宫内膜异位症的异位内膜和腹腔液中表达均明显升高；2 IL-6、IL-17和TGF-β和在子宫内膜异位症的发生发展中可能发挥了协同促进作用。 图20幅；表15个；参34篇。
子宫内膜异位症;发病机理;相关性;蛋白表达;免疫组织化学法
河北联合大学
硕士
基础医学
刘奕蓉
2015
中文
R711.71
66
2016-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）