CCL22、FOXP3、IL-10和IDO在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义
目的： B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non Hodgkin’s lymphoma，B-NHL)是起源于淋巴组织的恶性肿瘤，在淋巴瘤中发病率最高，随着对其认识的深入以及在分子生物学研究方面的进步，其中有些种类的B-NHL已经有了分子靶向药物，预后得到较大的改善，但总体上看，B-NHL的治疗和预后距离理想状态还有很长距离，仍然是严重影响人类健康的重要疾病之一，究其原因，最根本的是我们目前对B-NHL的发病机制还没有完全弄清。有关肿瘤发病机制的研究多集中于基因的突变与丢失，凋亡调控的紊乱，端粒酶的激活以及DNA修复系统的缺陷，其中还有一个很重要的环节是免疫监视能力的丧失或降低。研究已经证实在多种类型的肿瘤中肿瘤细胞自身可以合成分泌各种免疫抑制分子，和局部浸润的免疫细胞共同在细胞、分子和基因水平干扰有效的抗肿瘤免疫，使肿瘤细胞逃脱机体的免疫监视，免疫杀伤[1-3]。研究还发现肿瘤细胞的免疫逃逸以及诱导机体产生的免疫耐受对疾病的转归及预后具有显著的影响[4]。基于此，本文选用CCL22、FOXP3、IL-10及IDO四个指标，对B-NHL微环境中调节性T细胞及相关细胞因子在B-NHL中的作用进行观察和分析，初步探讨其在B-NHL发生中对肿瘤局部微环境免疫调节机制的影响，期望能从微环境免疫调节紊乱方向对B-NHL发生发展做出解释并为临床靶向治疗提供实验证据，从而改变B-NHL患者的预后。 方法： 本研究材料来自天津医科大学总医院病理科2011-2014年期间新诊断为B-NHL病例100例作为研究对象，其中弥漫大B细胞淋巴瘤74例，滤泡性淋巴瘤18例，套细胞淋巴瘤8例，选取同期手术切除的淋巴结反应性增生标本30例作为对照。采用免疫组织化学染色PV-6000二步法分别检测CCL22、FOXP3、IL-10及IDO在B细胞非霍奇金淋巴瘤及反应性增生淋巴结中的表达情况，实验数据采用SPSS16.0统计软件包进行统计学分析，定性资料选用x2检验，相关分析行Pearson法，以P<0.05为具有统计学意义。 结果： 1. CCL22，FOXP3，IL-10，IDO在B-NHL和反应性增生淋巴结中的表达 1.1 CCL22表达定位于细胞浆，在B-NHL中阳性表达率为57.0％，反应性增生淋巴结中阳性表达率为26.7%，CCL22在 B-NHL中的表达高于反应性增生淋巴结，差异具有统计学意义（χ2=8.493 P<0.01）； 1.2 FOXP3蛋白表达定位于细胞核，在B-NHL中阳性表达率为58.0%，反应性增生淋巴结中阳性表达率为36.7%，FOXP3在B-NHL中的表达高于反应性增生淋巴结，差异具有统计学意义（χ2=6.805 P<0.01）； 1.3 IL-10表达定位于细胞浆，IL-10在B-NHL中阳性表达率为61.0%，反应性增生淋巴结中阳性表达率为33.3%，IL-10在B-NHL中的表达高于反应性增生淋巴结，差异具有统计学意义（χ2=7.126 P<0.01）； 1.4 IDO表达定位于细胞浆，IDO在B-NHL中阳性表达率为65.0%，反应性增生淋巴结中阳性表达率为30.0%，IDO在B-NHL中的表达高于反应性增生淋巴结，差异具有统计学意义（χ2=11.529 P<0.01）； 2. CCL22，IL-10，IDO在B-NHL间质和反应性增生淋巴组织增生的表达 2.1 CCL22在B-NHL间质中的表达率为44.0%，反应性增生淋巴结间质中阳性表达率为20.0%，CCL22在 B-NHL间质中的表达高于反应性增生淋巴结间质，差异具有统计学意义（χ2=5.616 P<0.05）； 2.2 IL-10在B-NHL间质中的表达率为47.0%，反应性增生淋巴结间质中阳性表达率为26.7%，IL-10在B-NHL间质中的表达高于反应性增生淋巴结间质，差异具有统计学意义（χ2=3.909 P<0.05）； 2.3 IDO在B-NHL间质中的表达率为51.0%，反应性增生淋巴结间质中阳性表达率为26.7%，IDO在B-NHL间质中的表达高于反应性增生淋巴结间质，差异具有统计学意义（χ2=5.513 P<0.05）； 3 CCL22，FOXP3，IL-10，IDO的表达与临床病理参数的关系 3.1 CCL22在GCB DLBCL及non-GCB DLBCL中的表达率分别56.3%和66.7%，差异不具有统计学意义（χ2=0.803 P＞0.05）；CCL22的表达与肿瘤直径及临床分期中的表达具有相关性（P<0.05），在肿瘤直径大于5cm者及临床分期为Ⅲ-Ⅳ中的表达明显高于肿瘤小于5cm者和分期较低者。CCL22的表达与患者的年龄、性别、发病部位及淋巴瘤类型未发现相关性（P＞0.05）； 3.2 FOXP3在GCB DLBCL中的阳性表达率明显高于non-GCB DLBCL，分别为78.1%和31.0%，差异具有统计学意义（χ2=16.178 P<0.05）。FOXP3的表达与肿瘤直径及临床分期中的表达具有相关性（P<0.05），在肿瘤直径大于5cm者及临床分期为Ⅲ-Ⅳ中的表达明显高于肿瘤小于5cm者和分期较低者。FOXP3的表达与患者的年龄、性别、发病部位及淋巴瘤类型无明显相关性（P＞0.05）； 3.3 IL-10在 GCB DLBCL及 non-GCB DLBCL中的表达率分别为71.9%和57.1%，差异不具有统计学意义（χ2=1.701 P＞0.05）；IL-10的表达与肿瘤直径及临床分期中的表达具有相关性（P<0.05），在肿瘤直径大于5cm者及临床分期为Ⅲ-Ⅳ中的表达明显高于肿瘤小于5cm者和分期较低者。IL-10的表达与患者的年龄、性别、发病部位及淋巴瘤类型未发现相关性（P＞0.05）； 3.4 IDO在 GCB DLBCL及 non-GCB DLBCL中的表达率分别为68.8%和64.3%，差异不具有统计学意义（χ2=0.162 P＞0.05）； IDO的表达与肿瘤直径及临床分期中的表达具有相关性（P<0.05），在肿瘤直径大于5cm者及临床分期为Ⅲ-Ⅳ中的表达明显高于肿瘤小于5cm者和分期较低者。IDO的表达与患者的年龄、性别、发病部位及淋巴瘤类型未发现相关性（P＞0.05）； 4相关分析结果显示：B-NHL中 CCL22与 FOXP3的表达呈正相关 r=0.309（P<0.01），其余各指标之间表达均无相关性（P＞0.05）。 结论： 1. CCL22、IL-10及IDO在B-NHL肿瘤细胞及其间质中的高表达，提示肿瘤细胞本身和其周围的免疫细胞通过合成和分泌免疫分子共同参与免疫抑制微环境构建，促进B-NHL的发生、发展； 2. FOXP3阳性的调节性Treg细胞数量在B-NHL中明显高于反应性增生的淋巴结，提示Treg细胞是免疫抑制微环境构成的主要细胞；它接受来自于肿瘤细胞以及周围反应细胞的免疫信号而发挥作用； 3. CCL22、FOXP3、IL-10及IDO在肿瘤直径大于5cm者及临床分期为Ⅲ-Ⅳ中的高表达，揭示微环境的免疫抑制在促进肿瘤后期的进展中发挥更大作用；有望成为预后相关指标； 4. GCB DLBCL和non-GCB DLBCL中FOXP3阳性Treg细胞数量的不同，提示调节性 T细胞在 DLBCL的不同分子亚型中的作用存在差异，免疫抑制对GCB DLBCL的发生作用更大； 5. CCL22与FOXP3呈正相关，提示在B-NHL发生过程中CCL22在一定程度上促进FOXP3+调节性T细胞增生，募集，导致微环境中Treg细胞数量的增多，促进免疫抑制微环境的构建，从而促进B-NHL的发生。
B细胞非霍奇金淋巴瘤;免疫调节;CCL22蛋白;FOXP3蛋白;IL-10蛋白;IDO蛋白
天津医科大学
硕士
基础医学
高玉彤
2015
中文
R733.4
73
2016-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）