龙眼SVP基因的克隆及功能研究
本试验以‘四季蜜’、‘立冬本’龙眼嫁接新梢及‘红核子’龙眼叶芽为材料，研究不同龙眼品种中SVP同源基因序列的差异（包括基因序列的可变剪切）及表达差异，探究龙眼SVP同源基因在龙眼的成花调控网络中（包括花芽分化和幼年期调控）的作用。本试验主要获得了以下研究结果： 1．荧光定量PCR验证龙眼13个成花调控基因在‘四季蜜’和‘立冬本’嫁接新梢中表达的差异。结果表明，GI与FKF1基因在‘四季蜜’中均表达升高，SVP、FLC、EMF2的同源基因在‘四季蜜’中表达降低。龙眼中的TFL1同源基因TFL1(6027)与TFL1(6475)变化趋势不同，TFL1(6027)在‘四季蜜’中的表达稍高于‘立冬本’，而TFL1(6475)在‘四季蜜’中表达降低。LFY、 AP1与SOC1基因在两个品种中的表达差异不明显。 2．以‘四季蜜’龙眼嫁接新梢及‘红核子’龙眼叶芽为试验材料，克隆龙眼中的SVP同源基因，得到‘四季蜜’龙眼中SVP645基因的7个不同拷贝序列、SVP2719的7个可变剪切序列，‘红核子’龙眼中SVP645基因的7个不同拷贝序列、SVP2719的4个可变剪切序列。分析各序列，发现龙眼 SVP645基因的大多数拷贝在‘红核子’和‘四季蜜’中序列存在差异；SVP2719基因在‘四季蜜’和‘红核子’中的碱基序列基本无差异，编码区氨基酸序列完全一致。 3．荧光定量PCR分析两个龙眼SVP同源基因在‘红核子’品种中花芽分化过程的表达。结果显示，在1月份龙眼花芽开始形态分化的时候，SVP645基因的表达达到顶峰，而SVP2719基因表达却开始下降，表明 SVP645与 SVP2719基因可能具有不同的功能，SVP2719功能可能与抑制花芽分化有关。 4．选择‘四季蜜’中SVP2719的S-1和S-6号基因序列构建重组表达载体，根癌农杆菌介导转化本氏烟草。结果发现龙眼 SVP2719-S1基因使烟草的花蕾形状发生了变化，花蕾畸形，不能正常成花；SVP2719-S6基因使烟草的花朵形状发生了变化，花瓣畸形，但花瓣数、萼片、雌蕊、雄蕊无变化。
龙眼;SVP基因;基因克隆;荧光定量PCR
福建农林大学
硕士
园艺学
曾黎辉
2015
中文
S667.2
86
2016-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）