Keap1/Nrf2启动子区甲基化及其对Nrf2下游抗氧化基因转录调控在燃煤型砷中毒的作用
目的：研究燃煤污染型砷中毒抗氧化通路Keap1-Nrf2-ARE中Keap1、Nrf2基因甲基化状态及Nrf2调控的抗氧化基因GCLC、GCLM的mRNA表达情况，探讨其在燃煤型砷中毒中的作用。 方法：采用，甲基化特异的PCR法(MSP)检测砷暴露观察对象和正常对象外周血中Keap1、Nrf2启动子区甲基化状态，采用qReal timePCR检测GCLC、GCLM mRNA转录水平，并进行分析。 结果：1.Keap1甲基化结果：①阳性PCR产物为132bp;②砷暴露组甲基化阳性率为22.7％（47/207）。正常对照组甲基化阳性率为0.016(1/64)，暴露组明显高于正常对照组（P<0.05）。③病区非病人组甲基化阳性率为4.3%（2/46）；轻度砷中毒组甲基化阳性率为15.3%(7/46)；中度砷中毒甲基化阳性率为28.3%(17/60)；重度砷中毒组甲基化阳性率为38.2%(21/55)。砷暴露组 Keap1甲基化阳性率明显高于正常对照组；且随着砷中毒程度的加深，暴露组甲基化阳性率出现逐渐增高的趋势。2.Nrf2甲基化结果：①阳性 PCR产物为148bp;②暴露组甲基化阳性率为1.9%(4/207),正常对照组甲基化阳性率为0(0/64),正常对照砷暴露观察对象Nrf2基因的甲基化发生率差异无统计学意义。③病区非病人组甲基化阳性率为0(0/46)；轻度砷中毒组甲基化阳性率为2.2%(1/46)；中度砷中毒甲基化阳性率为3.3%(2/60)；重度砷中毒组甲基化阳性率为1.8%(1/55)。经统计学分析：正常对照与病区非病人以及轻、中、重度砷中毒患者Nrf2基因的甲基化发生率差异均无统计学意义。3.GCLC、GCLM mRNA表达结果：暴露组基因表达水平明显高于正常对照组. 结论：砷暴露可能导致 Keap1基因启动子区高甲基化，Keap1甲基化可能是抑制其 mRNA表达的主要原因之一。砷可能通过下调 Keap1和上调Nrf2表达，调控GCLC、GCLM的表达。
燃煤型砷中毒;启动子;甲基化;基因转录;调控作用
贵阳医学院
硕士
卫生毒理学
张爱华
2014
中文
R595
27
2016-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）