AngII及ROS对高血压合并胰岛素抵抗大鼠影响的实验研究
目的：(1)从血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）/活性氧（reactive oxygen species，ROS)的角度解释高血压与胰岛素抵抗之间的“纽带”联系机制;（2）为高血压病的防治提供新的“靶点”和新思路。 方法：实验分为5个组：（1）模型组：10只自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）、（2）坎地沙坦高剂量组（10只SHR，坎地沙坦4mg.kg-1.day-1）、（3）坎地沙坦低剂量组（10只SHR，坎地沙坦0.4mg.kg-1.day-1）、（4）对照组（10只Wistar大鼠）、（5）Tempol组（10只SHR，Tempol20μg.kg-1.day-1）。除对照组饮用自来水外，其余各组均饮用10％果糖水，各组于实验开始时灌胃给药，每天1次，连续给药8周，每4周测量一次血压；实验结束时，股动脉放血法处死动物，精密称取左心室重；游标卡尺测量左心室厚度和主动脉内径，主动脉管壁厚度；用血糖仪测量大鼠血糖；采用放免法检测每只大鼠的胰岛素(insulin，INS)水平和AngⅡ；ELISA法检测主动脉中ROS的含量；HE染色，观察主动脉病理组织学改变；免疫组化法检测主动脉中血管紧张素Ⅱ的1型受体（AngiotensinⅡtype1 receptor，AT1-R）、血管紧张素Ⅱ的2型受体（AngiotensinⅡ type2 receptor，AT2-R）表达；Western blot法检测主动脉中磷酸化的蛋白激酶B（protein kinaseB，Akt）的表达；用实时荧光定量PCR法检测主动脉磷酸化Akt的mRNA的表达。 结果：（1）与对照组比较，模型组大鼠平均动脉压、血糖和INS均升高(P<0.01或 P<0.05)；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组、坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠平均动脉压、血糖和INS均降低(P<0.01或P<0.05)。（2）与对照组比较，模型组大鼠血浆AngⅡ增加(P<0.01)；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组，坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠血浆AngⅡ没有显著变化，无统计学意义。（3）与对照组比较，模型组大鼠主动脉ROS含量升高(P<0.01)，经过治疗后，坎地沙坦高剂量组、坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠与模型组大鼠比较，主动脉ROS含量均降低(P<0.01或P<0.05)。（4）与对照组比较，模型组大鼠胰岛素抵抗指数明显升高(P<0.01)；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组和Tempol组大鼠胰岛素抵抗指数降低(P<0.01)。（5）与对照组比较，模型组大鼠的左心室重和左心室厚度明显增厚(P<0.01)；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组，坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠的左心室重和左心室厚度明显降低(P<0.01)。与对照组比较，模型组大鼠主动脉内径和主动脉管壁厚度增大(P<0.05)；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组，坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠主动脉动脉内径和主动脉管壁厚度减小，其中坎地沙坦高剂量组差异有统计学意义(P<0.05)，Tempol组大鼠主动脉动脉内径差异有统计学意义(P<0.05)。（6）光镜下各组的病理变化：模型组的大鼠有主动脉管壁轻度变性，主动脉管壁明显增厚，内皮细胞脱落；坎地沙坦高剂量组的大鼠少数有主动脉管壁轻度变性和主动脉管壁轻度增厚，内膜、中膜及外膜层次结构接近正常；坎地沙坦低剂量组的大鼠主动脉管壁轻度变性和主动脉管壁轻度增厚；主动脉内皮细胞脱落等的变化；Tempol组的大鼠主动脉管壁轻度增厚，主动脉内皮细胞脱落；对照组的大鼠主动脉组织结构接近正常，内膜、中膜及外膜层次结构清楚。（7）与对照组比较，模型组大鼠的AT1-R平均光密度值明显增大（P<0.01）；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组、坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠的AT1-R平均光密度值均降低（P<0.01）；而各组大鼠的AT2-R平均光密度值变化不明显，没有统计学意义。（8）与对照组比较，模型组大鼠的Akt的蛋白表达降低(P<0.01)，与模型组比较，坎地沙坦高剂量组、坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠 Akt的蛋白均升高(P<0.05)。（9）与对照组比较，模型组大鼠磷酸化Akt的mRNA表达显著下降(P<0.01)；与模型组比较，坎地沙坦高剂量组，坎地沙坦低剂量组和Tempol组大鼠磷酸化Akt的mRNA表达增加，其差异有统计学意义(P<0.05)。 结论：（1）SHR大鼠给予果糖喂养，可成功建立高血压合并胰岛素抵抗的大鼠模型，该模型符合人类高血压合并胰岛素抵抗的病理特点；（2）AT1受体阻断药与 ROS抑制药在降低血压的同时，还能减轻胰岛素抵抗；（3）AT1受体阻断药和ROS抑制药均可减轻高血压合并胰岛素抵抗的发生，其作用机制与上调磷酸化Akt蛋白与mRNA的表达相关。
自发性高血压;坎地沙坦;胰岛素抵抗;血管紧张素Ⅱ;活性氧
贵阳医学院
硕士
药理学
罗俊;叶兰
2013
中文
R544.1;R587.1
50
2016-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）