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DOI:10.7666/d.D625161

基于纳米金放大的压电DNA传感器的研究

杨云
湖南工业大学
引用
DNA传感器具有检测时间短,既可定性又可定量,灵敏度高、选择性好的优点,受到了人们的广泛重视。近年来,纳米技术与DNA传感检测技术的结合已成为重要的发展方向。  本课题结合运用纳米技术、生物技术以及石英晶体微天平(Quartz Crystal Microbalance, QCM)技术,以实现对DNA的高灵敏度检测。课题主要内容如下:  1.制备了纳米金溶胶,分别经紫外可见分光光度计、纳米粒度分析仪和透射电镜的相关表征,样品分散理想,粒径较为均匀;  2.设计并制作了QCM动态检测装置,改进了QCM检测方法,实现了在线冲洗与动态检测。通过封闭式动态、封闭式静态与开放式静态三种检测模式的DNA自组装效果的对比,前者的频率降达到了93Hz,远高于后两种模式的59Hz与56Hz。改进后的全封闭动态检测系统能较好的满足压电DNA传感器的检测需要,检测性能更加稳定可靠。  3.在原理性实验中,利用纳米金的质量放大作用提高检测灵敏度。筛选出纳米金粒径为5 nm,浓度为7μl纳米金溶胶兑50μl缓冲液的优化条件。纳米金单层杂交放大的灵敏度为100fM,去除背景后,正配比错配一个碱基的频率降比值为2.26:1;纳米金双层放大的检测灵敏度为10 fM,去除背景后正配:错配一个碱基的频率降比值为2.17:1。  4.对亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的677TT突变纯合型进行了检测。纳米金单层放大的检测灵敏度为100 fM,正配:错配信号的比值为2:1,能明显区分正错配;纳米金双层放大的检测灵敏度达10 fM,正配:错配信号的比值为2.4:1,能明显区分正错配。双层放大检测灵敏度比单层放大时可提高一个数量级。

DNA传感器;纳米金溶胶;石英晶体微天平;双层放大检测

湖南工业大学

硕士

材料学

陈洪;聂立波

2007

中文

O648.16

73

2015-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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