穿心莲提取物对小鼠腘窝淋巴结模型及P815细胞脱颗粒模型的作用研究
目的：穿心莲注射液临床过敏反应多有发生，其安全问题亟需解决，利用小鼠直接法腘窝淋巴结(D-PLNA)试验及P815细胞脱颗粒模型对穿心莲提取分离物进行类过敏成分筛选，为穿心莲制剂的质量控制和安全有效性提供参考。 方法：(1)建立直接腘窝淋巴结模型：雌性BABL/c小鼠随机分组，小鼠一侧单次足趾部皮下给予受试物，每天测量足趾的厚度；6天后处死，摘取两侧淋巴结(PLN)，称重，确定最佳取材时间，计算重量指数(Weights index，WI)，细胞指数(cells index，CI)，比较PLN组织病理的变化。 (2)临床常见易发生过敏反应的清热类中药注射液验证腘窝淋巴结模型的可行性 (3) BALB/c小鼠腘窝淋巴结试验及P815细胞脱颗粒试验用于穿心莲提取物致敏性的筛选研究，采用小鼠D-PLNA模型，以淋巴结重量指数(WI)及细胞指数(CI)、淋巴结病理切片为指标，对穿心莲各级提取物进行致敏性研究。采用P815肥大细胞模型,观察穿心莲各级提取物对细胞脱颗粒百分率，组胺含量、氨己糖苷酶释放度的影响，并进一步评价穿心莲提取物的致敏性，探讨潜能的致敏成分。 结果：(1)成功建立小鼠腘窝淋巴结试验模型，50μg氯化汞和0.75mg双氯酚酸钠可作为腘窝淋巴结试验中的阳性药，试验结果分别为氯化汞WI=3.39±0.76，CI=6.82±1.28，双氯酚酸钠WI=2.33±0.35，CI=5.51±0.93。 (2)腘窝淋巴结试验中肿节风(ZJFI)、清开灵(QKLI)及穿心莲(CXLI)注射液呈阳性结果，与临床报道中中药注射液的不良反应结果大致一致。腘窝淋巴结试验具有可行性。 (3)D-PLNA实验结果显示：穿心莲粗提物(AEE)组、乙酸乙酯部位(EAE)组及正丁醇部位(NBE)组的淋巴结重量均显著增加，淋巴数目明显增多，淋巴结重量指数WI>2,细胞指数CI>5；而水部位(AE)组淋巴结重量未见增加。三个穿心莲内酯单体组：NAD、AND、DDA均出现淋巴结重量增加，淋巴数目明显增多，WI>2，CI>5；细胞实验结果显示：穿心莲粗提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和三个穿心莲内酯单体(NAD、AND、DDA）均能可显著提高P815细胞脱颗粒百分率、组胺含量及氨己糖苷酶释放度。 结论：小鼠腘窝淋巴结试验最佳取材时间为给药后第5天，D-PLNA用于药物类过敏物质的筛选具有可行性，穿心莲提取物(AEE、TLA、EAE、NBE)及三个穿心莲内酯单体(NAD、AND、DDA)具有潜在的致敏性。穿心莲内酯是其抗炎、解热、抗菌的有效成分同时也为致敏的物质。因此在穿心莲注射液的质量控制中，在保证安全有效的基础上，尽量降低穿心莲内酯的含量，这样既有利于增强安全性，又可节约药材，其安全、有效的剂量值得进一步的研究。
穿心莲提取物;腘窝淋巴结;细胞脱颗粒;质量控制;安全有效性
广东药学院
硕士
中药学
胡旭光;王伟
2014
中文
R282.71;R285
51
2015-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）