嗜酸乳杆菌肽聚糖的修饰及其对小鼠肠黏膜保护作用研究
肽聚糖（peptidoglycan,PG）是细菌细胞壁的重要组成部分之一，本论文以嗜酸乳杆菌胞壁肽聚糖为研究对象。从嗜酸乳杆菌细胞壁中分离提取肽聚糖并纯化肽聚糖。首先将细胞壁破碎，并除去其磷壁酸、蛋白质和脂肪，经透析冷冻干燥最后得到纯化样品PG。采用TEMPO/NaClO/NaBr催化氧化体系对纯化后肽聚糖进行修饰提高肽聚糖的溶解性；并对修饰前后PG的可溶性糖含量进行分析，修饰后PG的溶解性大大提高。对嗜酸乳杆菌胞壁肽聚糖修饰的最佳工艺条件进行了研究。通过单因素实验确定反应温度、反应 pH、底物浓度的取值范围，再用正交实验确定最佳氧化修饰条件。结果表明：反应温度、反应pH及NaClO添加量能显著改善嗜酸乳杆菌细胞壁肽聚糖可溶性程度，当反应温度5℃、反应pH8.5、NaClO添加量2.5mg/ml时可溶性糖含量达到最大值。 研究了选择性氧化前后肽聚糖抗氧活性。通过动物实验，检测了小鼠血清超氧化物歧化酶（super oxide dismutase, SOD）、GSH-PX活力和丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量。研究了选择性氧化肽聚糖对由环磷酰胺引起免疫损伤的保护作用。结果表明，灌胃选择性氧化修饰肽聚糖的小鼠与对照组相比，抗氧化能力显著提高；环磷酰胺可以引起小鼠的免疫损伤，导致小鼠脾、胸腺萎缩，腹腔巨噬细胞吞噬功能下降。选择性氧化修饰的肽聚糖可显著拮抗由环磷酰胺（CY）致免疫损伤小鼠的脾指数、胸腺指数下降，因此选择性氧化修饰的肽聚糖具有调节免疫损伤小鼠免疫功能的作用。 研究了肽聚糖对感染致病性大肠杆菌小鼠肠黏膜分泌性免疫球蛋白(SIgA)、血清干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及小肠黏膜厚度、绒毛高度和隐窝深度等影响，探讨肽聚糖对感染致病性大肠杆菌小鼠肠黏膜的保护作用及机制。
嗜酸乳杆菌;肽聚糖;氧化修饰;肠黏膜保护;免疫损伤
宁波大学
硕士
食品工程
潘道东
2014
中文
TS201.2
59
2015-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）