雌激素残留检测技术的研究与应用
随着工业社会的繁荣发展，人类日益暴露在雌激素环境中，雌激素直接或间接地对人类与动物造成不同程度的危害，甚至导致癌变死亡。2000年，国家自然科学基金委员会以“环境类激素影响人类健康的机理”为重点项目予以招标，在我国正式启动了对环境激素类物质的大规模研究。而到目前为止，有关雌激素的检测手段还比较单一，多渠道、多角度、快速、灵敏的检测手段有待进一步开发与加强，以便实现对雌激素的长效监控。 本论文从以下几个方面展开研究工作： 一、本研究利用高效液相(HPLC)色谱法来实现对雌二醇、雌三醇、炔雌醇、雌素酮、乙烯雌酚的精确灵敏检测。在优化色谱条件下，建立以上5种雌激素的标准曲线，且R2≥0.9992。并利用该方法对同一组样品进行5次平行实验，确定其相对标准偏差在2.5％以内。且分别以鸭、鹅、鱼进行不同浓度的加标实验，实验结果表明不同加标浓度，其加标回收率均在87.1%～103.5%之间。并且本实验对来自浙江、江苏5个不同地区的鸭、鹅、鱼15个样品进行检测分析。以上实验结果表明，该方法灵明度高，回收率好，重现性强，且样品制备较简单，因此适用于水禽及水产品中雌激素的检测。 二、基于薄层石墨烯优异的导电性及生物兼容性及表面吸附性，构建了基于薄层石墨烯的酪氨酸酶生物传感器。本研究首先利用化学还原法制备了薄层石墨烯，并利用透射电镜(TEM)，选区电子衍射(SAED)对其进行表征。然后将薄层石墨烯、壳聚糖、酪氨酸酶按一定比例混合，制备石墨烯-酪氨酸酶-壳聚糖电极(GR-Tyr-CS/GCE)。在优化pH及温度等检测条件后，电流-时间法(I-T)测得双酚A(BPA)的浓度线性范围为7.5×10-8~2.5×10-6mol L-1，相关系数R2=0.997，检测限为：2.18×10-8mol L-1(信噪比S/N=3)。这项工作将为BPA残留提供灵敏、快速、简便的检测方法。 三、基于石墨烯-金复合物的生物兼容性、表面吸附性及优异的电子传输性，以及酪氨酸酶对 BPA的催化氧化还原作用，构建了基于石墨烯/金的酪氨酸酶生物传感器。利用透镜(TEM)、拉曼(Rama)、能谱(EDS)等技术表征石墨烯/金复合材料，并制备石墨烯/金-酪氨酸酶-壳聚糖电极(GR/Au-Tyr-CS/GCE)。在一定浓度的BPA溶液中进行循环伏安扫描，优化底液 pH及温度等检测条件，利用差分脉冲伏安法(DPV)测得 BPA的浓度线性范围为2.5×10-8~3×10-6 mol L-1，线性回归方程为Ip=3.156C+11.437，相关系数R2=0.998，检测出现为1.64×10-8 mol L-1(信噪比 S/N=3)。该项工作可用于 BPA痕量分析。
雌激素;残留检测;生物传感器;表面吸附性;差分脉冲伏安法
宁波大学
硕士
食品科学
潘道东
2014
中文
TS207.3
66
2015-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）