三疣梭子蟹RXR基因在蜕皮和卵巢发育过程中的表达分析
为了研究维甲酸类X受体(retinoid X receptor,RXR)基因在甲壳动物蜕皮和卵巢发育中的作用，本研究首先通过反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)RXR基因(PtRXR)全长cDNA序列。序列分析表明：PtRXR cDNA全长1365 bp，包含25 bp的5’末端非编码区(UTR)，1140 bp的开放阅读框(ORF)，以及200 bp的3’UTR，该基因可编码379个氨基酸。PtRXR氨基酸序列包含从N端的A/B域(转录激活域)到C端的E域(配体结合域)4个核受体特征结构域。经氨基酸序列比对可知，PtRXR与其他已知甲壳动物的RXR氨基酸序列高度同源。系统进化树显示，PtRXR与其他甲壳动物RXR聚在一起，并且与脊椎动物RXR的亲缘关系要近于昆虫的超气门蛋白(ultraspiracleprotein, USP)。本研究运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测PtRXR的组织分布特性和在蜕皮、卵巢发育过程中的表达特征。组织分布研究显示，PtRXR广泛存在于所检测的三疣梭子蟹组织，且高表达于卵巢和Y-器。蜕皮过程中，PtRXR在Y-器和大颚器中的表达量从蜕皮间期C期开始下降，在整个蜕皮前期维持较低水平，蜕皮完成后上升到较高水平，表明PtRXR在三疣梭子蟹蜕皮过程中起着重要的作用。卵巢发育过程中，PtRXR在所检测的卵巢、肝胰腺、Y-器和大颚器中都有表达，一次卵巢发育中，卵巢和肝胰腺的PtRXR表达量从卵巢发育初期开始逐渐上升，当卵巢进入发育快速期(Ⅲ期)和发育旺盛期(Ⅳ期)时达到较高值，成熟时期(Ⅴ期)突然下降；Y-器中的表达量峰值出现在发育快速期(Ⅲ期)，在卵巢发育旺盛期(Ⅳ期)和成熟期(Ⅴ期)较低；大颚器中的表达量变化差异则不是很明显。二次卵巢发育中，4个组织的PtRXR表达量随着卵巢的成熟逐渐上升，并且在卵巢发育接近成熟时期达到最大值。这表明PtRXR与三疣梭子蟹的卵巢发育密切相关，可能参与卵巢发育的卵黄发生。
三疣梭子蟹;RXR基因;蜕皮过程;卵巢发育;系统进化树
宁波大学
硕士
海洋生物学
朱冬发
2014
中文
S968.252;S917.4
54
2015-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）