蓝红胶囊质量标准及蓝刺头指纹图谱研究
目的：补充完善蓝红胶囊质量标准，对蓝红胶囊进行全面的质量控制和评价。对蓝刺头药材进行质量控制方法及指纹图谱研究，以确定蓝红胶囊所用的蓝刺头的品种、产地和来源。对蓝刺头药材进行初步毒理和抗炎作用研究，为蓝刺头的临床应用和开发奠定基础。 方法：以硅胶为固定相，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（4:1:1:0.5）为展开剂，采用直接检视和三氯化铝试液显色法，对蓝红胶囊中红花和蓝刺头药材进行定性鉴别；以硅胶为固定相，三氯甲烷-甲醇-水（3:1:0.1）和正丁醇-乙酸乙酯-水（4:1:5）上层溶液为展开剂，采用10％硫酸乙醇溶液为显色剂，分别对蓝红胶囊中的杜仲和三七药材进行定性鉴别；对蓝红胶囊中珍珠进行理化鉴别。采用单因素考察优选蓝红胶囊中蓝刺头、红花、三七供试品制备方法。采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，分别以乙腈-醋酸铵缓冲盐水溶液（21:79）和（9:91）为流动相，柱温分别为25℃和30℃，流速1ml/min，检测波长分别为340nm和403nm，对蓝红胶囊中芹菜素-7-O-葡萄糖苷和羟基红花黄色素A进行含量测定；采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，分别以甲醇-水、乙腈-水为流动相梯度洗脱，柱温分别为30℃和25℃，流速1ml/min，采用277nm波长下紫外检测和蒸发光散射检测方法，测定蓝红胶囊中松脂醇二葡萄糖苷和三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的含量。采用蓝红胶囊中蓝刺头成分含量测定方法，测定蓝刺头药材中芹菜素-7-O-葡萄糖苷的含量。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-醋酸铵缓冲盐溶液为流动相梯度洗脱，柱温30℃，流速1ml/min，检测波长为340nm，采用高效液相色谱法建立蓝刺头药材的指纹图谱。使用D101型大孔树脂对蓝刺头提取物进行分离纯化。采用最大给药量法对蓝刺头纯化物进行急性毒性反应的考察；选用二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验，考察蓝刺头纯化物抗炎作用。结果：蓝红胶囊中蓝刺头、红花、杜仲、三七药材的薄层色谱中，斑点清晰，阴性对照无干扰；采用理化方法能有效地对蓝红胶囊中珍珠进行定性鉴别。优选确定了蓝红胶囊中蓝刺头、红花、三七的供试品制备方法。建立的高效液相色谱法可以快速测定蓝红胶囊中指标成分的含量，方法学考察中，芹菜素-7-O-葡萄糖苷、羟基红花黄色素A、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd在标曲范围内线性关系均良好，相关系数r均大于0.9993，方法的精密度、重复性、耐受性、稳定性均良好。不同批次蓝红胶囊供试品中芹菜素-7-O-葡萄糖苷、羟基红花黄色素A的含量分别在0.038%~0.050%、0.35%~0.91%之间，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的含量分别在0.25%~0.51%、1.13%~2.02%、0.13%~0.24%、0.87%~1.59%、0.19%~0.49%之间。以外标一点法测得不同批次蓝红胶囊供试品中松脂醇二葡萄糖苷的含量在0.023%~0.083%之间，含量限度在0.10mg~0.34mg之间。蓝刺头供试品中芹菜素-7-O-葡萄糖苷的含量在0.005%~0.081%之间，含量波动较大。建立的蓝刺头药材的指纹图谱中，采用相对保留时间（参照最高峰S峰）标定了12个共有峰：1（0.423）；2（0.535）；3（0.639）；4（0.858）；5（S，1.000）；6（1.042）；7（1.072）；8（1.307）；9（1.751）；10（1.790）；11（1.891）；12（1.932），其中1、3、8、11号共有峰分别为绿原酸、咖啡酸、芹菜素-7-O-葡萄糖苷和芹菜素。使用D101型大孔树脂将蓝刺头提取物分离为D101水+30%乙醇浸膏组、D10150%乙醇浸膏组、D10170%+95%乙醇浸膏组三个部分。蓝刺头纯化物急性毒性反应试验中，给药后连续观察14天内，无动物死亡，脏器未发现明显病变，测得D101水+30%乙醇浸膏组、D10150%乙醇浸膏组、D10170%+95%乙醇浸膏组的最大给药量分别相当于临床日用量的854、415、383倍。抗炎试验结果表明，阿司匹林组和D101-30%中、高剂量组，D101-50%中、高剂量组，D101-70%+95%中、高剂量组均能抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀程度。比较组间差异发现 D101-50%高剂量组和D101-70%+95%高剂量组对急性炎性肿胀抑制作用与阿司匹林相当，D101-30%部分抗炎作用相对较小。 结论：建立的蓝红胶囊和蓝刺头定性和定量方法简便、快速、专属性强、重复性好、无干扰，可很好地控制蓝刺头药材及其制剂的质量，有利于提高蓝红胶囊临床用药的安全性和有效性。蓝刺头指纹图谱为蓝刺头药材提供了更加全面的质量评价信息，更好地控制了以蓝刺头为主药组成的复方制剂“蓝红胶囊”的质量，有效地确保了蓝红胶囊的临床用药质量的稳定性。蓝刺头提取物的初步毒理和抗炎作用研究为蓝刺头的临床应用和开发奠定了坚实的基础。
蓝红胶囊;质量标准;蓝刺头;指纹图谱
新疆医科大学
硕士
药剂学
李岩;王长虹
2014
中文
R284.1
123
2015-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）