棉酚旋光异构体的检测方法及其在大鼠体内、外代谢的初步研究
目的：建立棉籽仁和复方醋酸棉酚片中左旋棉酚和右旋棉酚含量检测的HPLC法，以及棉酚在大鼠肝微粒体的体外代谢模型，并对棉酚在大鼠体内、外代谢情况进行初步探讨。 方法：1. HPLC法测定棉籽仁和复方醋酸棉酚片中左旋棉酚和右旋棉酚的含量：以(R)-(-)-2-胺基-1-丙醇为手性拆分试剂，用10％冰醋酸的N,N-二甲基甲酰胺作为溶剂，经 Agilent XDB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离，流速1.0mL/min，其中HPLC-UV法的流动相为乙腈:10mM KH2PO4(pH=3.0)=80:20，检测波长247nm；HPLC-MS法的流动相为乙腈:1.0%甲酸=85:15，柱后分流比为15%，在电喷雾正离子模式下对m/z633.2进行选择性离子监测。2.选240±10g的SD系雄性大鼠若干，以苯巴比妥钠作为肝酶诱导剂，采用钙盐沉淀法制备肝微粒体，考马斯亮蓝法进行蛋白含量测定，以非那西丁作为底物进行P450酶活性评价，以此模型进行棉酚的体外代谢研究。3.选240±10g的SD系雄性大鼠若干，棉酚按80mg/Kg/d的剂量连续灌胃给药一周，采用UPLC-MS/MS法进行棉酚在大鼠肝脏和血浆中代谢情况的初步研究。 结果：1.新疆地区的棉籽仁中(-)-棉酚含量为1.62～4.09mg/g，(+)-棉酚含量为2.33～5.69mg/g，比例约为1:1.27~1.47。2.复方醋酸棉酚片中含(-)-醋酸棉酚含量为9.55～9.82mg/片，(+)-醋酸棉酚含量为10.0～10.5mg/片，比例约为1:1。3.棉酚在大鼠肝微粒体的体外代谢研究中，疑为有代谢产物gossypolone生成；通过对比大鼠体内试验，(-)-棉酚在大鼠体内的含量相对较快。 结论：本课题所建立的(-)-和(+)-棉酚含量测定的HPLC法，具有良好的专属性、灵敏度、准确度和精密度，样品处理方法简便，同时进行了棉酚在大鼠的体内、外代谢的初步研究，为棉酚的深入研究提供一定的基础。
肝微粒体;棉酚旋光异构体;检测方法;动物模型;体外代谢模型
新疆医科大学
硕士
药物化学
李新霞
2013
中文
R969.1
60
2015-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）