心功能自然衰退过程中线粒体PT孔对线粒体呼吸功能的影响及机制研究
目的：研究随年龄增长线粒体通透性转换孔开放改变与线粒体呼吸功能的改变的关系及其可能的潜在机制。
方法：密度梯度离心分离心肌线粒体；用氧电极法检测线粒体呼吸功能；分光光度法检测MPTP开放；采用酶解法分离大鼠心肌细胞,并用荧光显微镜法检测线粒体膜电位；紫外分光光度法检测各线粒体呼吸复合体的活性；蛋白免疫印迹法检测MPTP蛋白表达。
结果：从电镜图中可见衰老大鼠心肌线粒体形态发生了明显改变,表现为外膜破裂,内脊断裂,线粒体内部形成空泡；线粒体呼吸功能也随年龄的增长而下降,与3月龄组相比,15月龄组开始出现显著性变化(p<0.05),这种变化随年龄增长更加明显(p<0.01)；MPTP开放能够导致线粒体呼吸功能的下降(p<0.05),而抑制呼吸功能不能引起MPTP的开放(p>0.05)；进一步探寻MMP在两者之间的作用可以发现, MPTP开放能够引起MMP的降低(p<0.05),MMP的下降虽然不影响线粒体的氧化水平(p>0.05),但可以通过解耦连而抑制ADP磷酸化过程；而抑制线粒体呼吸功能不能引起MMP下降(p>0.05),且MMP下降也不能导致MPTP开放(p>0.05)；对于MPTP调节线粒体呼吸功能的机制的进一步探究发现,MPTP开放没有抑制线粒体呼电子传递链的功能(p>0.05),但是使老年大鼠的腺苷酸转运体ANT1表达增强,ANT2表达减少。CyP-D的表达显著增强(p<0.05)。
结论：随年龄增长线粒体PT开放增强可通过降低线粒体膜电位抑制线粒体呼吸功能；线粒体PT孔的腺苷酸转位酶ANT1和ATN2表达变化及CyP-D表达增强可能是衰老大鼠线粒体PT孔开放增强的重要机制。
衰老;心肌;线粒体通透性转换孔;线粒体呼吸功能
三峡大学
硕士
药理学
张世忠
2013
中文
2014-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）