仙茅总苷对围绝经期综合征动物模型的干预研究
目的：观察仙茅总苷对围绝经期小鼠、围绝经期抑郁小鼠和围绝经期大鼠模型的影响。通过测定围绝经期模型动物的相应行为学指标,相关脏器指数,血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH) 水平,并观察相关组织病理形态的变化；围绝经期抑郁小鼠模型同时测定脑匀浆中 5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)的含量；围绝经期大鼠模型同时测定促性腺激素释放激素(GnRH)、白介素-2(IL-2)及骨钙素(BGP) 水平,血浆中β-内啡肽(β-EP)的水平,相关组织的雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)含量,及下丘脑中 Bcl-2 和Bax含量；从而探讨仙茅总苷对围绝经期综合征疾病的治疗作用及特点。 方法：采用背部双侧完全切除卵巢的方法复制围绝经期小鼠模型。造模后第10天给予更年安胶囊(675mg·kg-1),大豆异黄酮软胶囊(250mg·kg-1),大、中、小剂量仙茅总苷(400mg·kg-1、200mg·kg-1、100mg·kg-1)药物处理,将相应药物溶解于0.5%羧甲基纤维素钠中制成混悬液灌胃,空白组与模型组同时给予同体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续21d。给药18~20d时,测定小鼠5min内自主活动次数,首次进入暗室的潜伏期及5min内遭电击的次数。末次给药后2h,测定小鼠的子宫、胸腺、脾脏湿重并计算脏器指数,检测血清 E2、T、FSH、LH 水平,光镜下观察子宫、胸腺、脾脏、下丘脑组织形态的变化。 采用背部双侧完全切除卵巢结合慢性刺激的方法复制围绝经期抑郁小鼠模型。卵巢切除后第 10 天给予更年安胶囊(675mg·kg-1) ,大豆异黄酮软胶囊(250mg·kg-1),大、中、小剂量仙茅总苷(400mg·kg-1、200mg·kg-1、100mg·kg-1)药物处理,将相应药物溶解于 0.5%CMC中制成混悬液灌胃,空白组与模型组同时给予同体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续30d。给药5d后,空白组小鼠5只/笼饲养,造模型小鼠单笼饲养,每天接受不同刺激,共 18d,造围绝经期抑郁小鼠模型。给药 25~27d 时,测定小鼠 5min 内自主活动次数,首次进入暗室的潜伏期及5min内遭电击的次数。给药28~29d时,测定小鼠强迫游泳和悬尾实验6min内第2~6min的不动时间。末次给药后2h,测定小鼠的子宫、胸腺、脾脏湿重并计算脏器指数,取1/2脑制备脑组织匀浆,测定脑组织匀浆中5-HT、DA的含量,检测血清 E2、T、FSH、LH 的水平,光镜下观察子宫、胸腺、脾脏、下丘脑组织形态的变化。 采用背部单侧卵巢全切、另侧切除 80%的方法复制围绝经期大鼠模型。造模后第10天给予更年安胶囊(450mg·kg-1),大豆异黄酮软胶囊(170 mg·kg-1),大、中、小剂量仙茅总苷(267mg·kg-1、133mg·kg-1、67mg·kg-1)药物处理,将相应药物溶解于0.5%CMC中制成混悬液灌胃,空白组与模型组同时给予同体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续35d。于给药34d,测定大鼠水平-垂直运动积分。末次给药后2h,测定大鼠的子宫、胸腺、脾脏湿重并计算脏器指数,将下丘脑、垂体、卵巢和1/2子宫制备组织匀浆,测定组织匀浆中雌、雄激素受体的含量,测定下丘脑中Bcl-2、Bax的含量。检测血清中E2、T、LH、FSH、GnRH、BGP 、IL-2的含量,血浆β-EP含量,光镜下观察子宫、胸腺、脾脏组织形态的变化。 结果：围绝经期小鼠模型复制成功,模型组小鼠自主活动次数、首次进入暗室的潜伏期、子宫指数、E2、T 水平均显著下降,遭电击次数、FSH、LH 水平显著升高。仙茅总苷能增加围绝经期模型小鼠的活动性,增强小鼠记忆力,能明显或显著的提高其子宫、胸腺、脾脏指数和 E2、T水平,并降低FSH、LH水平,并改善子宫、胸腺、脾脏、下丘脑的病变情况。 围绝经期抑郁小鼠模型复制成功,模型组小鼠自主活动次数、首次进入暗室的潜伏期、脑内5-HT及DA含量、子宫、胸腺、脾脏指数、血清E2、T水平均显著下降,遭电击次数、游泳和悬尾不动时间、血清FSH、LH水平显著升高。仙茅总苷能增加围绝经期抑郁模型小鼠的活动性,潜伏期,增强小鼠记忆力,减少遭电击次数、强迫游泳及悬尾不动时间,能明显或显著提高子宫、胸腺、脾脏指数、血清E2、T水平、脑内5-HT及DA含量,降低 血清FSH、LH水平,并改善子宫、胸腺、脾脏、下丘脑的病变情况。 围绝经期大鼠模型复制成功,模型组大鼠水平-垂直积分、子宫、胸腺、脾脏指数、血清E2、T、IL-2、 BGP、血浆β-EP水平均显著下降,血清FSH、LH、GnRH 水平显著升高；下丘脑、垂体中 AR,下丘脑、垂体、子宫、卵巢中ER 含量均显著降低,下丘脑中 Bcl-2降低,Bax 升高。仙茅总苷能增加围绝经期模型大鼠的活动性,能明显或显著的提高其子宫、胸腺、脾脏指数和血清E2、T、IL-2、 BGP、血浆β-EP水平,并降低血清FSH、LH、GnRH水平,显著或明显升高下丘脑、垂体中 AR,下丘脑、垂体、子宫、卵巢中 ER 含量,升高下丘脑中 Bcl-2 含量,降低 Bax 含量,并改善子宫、胸腺、脾脏的病变情况。 结论：仙茅总苷各剂量组不仅能对抗围绝经期综合征的性激素(E2、T、FSH、LH)紊乱,还能够调整雌雄激素受体(ER、AR)水平的失调,并提高机体免疫功能、减少细胞凋亡、纠正骨质疏松状态,具有增强和恢复子宫、胸腺、脾脏、下丘脑神经细胞的作用；对围绝经期抑郁模型,除有上述作用外,对其脑匀浆中的单胺类神经递质及精神状态亦有明显的改善作用。
仙茅总苷;围绝经期综合征;围绝经期抑郁;动物模型
河南中医药大学;河南中医学院
硕士
药理学
苗明三
2013
中文
2014-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）