广东桉树叶化学成分及其抗菌抗氧化活性研究
桉树(Eucalyptus)是桃金娘科植物,用途广泛,桉树叶化学成分复杂,含有挥发油、黄酮、鞣质、三萜类等,其化学成分常有抑菌、抗肿瘤、降血糖、抗氧化等生物活性。 本文以广东产(茂名市国营丽岗林场)的桉树种类—窿缘桉、刚果12号桉、广林九号桉、尾叶桉U6和广州一号桉共5种桉树叶为研究对象,对其化学成分及挥发性成分进行成分分析和抗菌抗氧化活性研究,采用不同的评价方法对桉树叶不同有效部位清除自由基的能力进行评价,并且采有响应面法优化了桉叶中总黄酮的提取工艺,研究结果对了解广东窿缘桉等五种桉树叶中的化学成分、部分生物活性和综合利用具有重要的意义。主要研究内容及结果如下: (1)采用L9(34)正交试验探究了广东桉树叶(窿缘桉叶)挥发油提取工艺,确定最佳工艺条件。利用GC-MS联用技术对广东窿缘桉、刚果12号桉、广林九号桉、尾叶桉和广州一号桉等5种桉叶挥发油的化学成分进行了定性定量分析。结果显示,广东桉树叶(窿缘桉叶)挥发油的最佳提取工艺为加热提取3h,加水量7倍,浸泡4h。5种桉叶挥发性成分的提取率为0.36％~0.86%(以干重计)。窿缘桉叶挥发油的主要成分为萜类和萜醇类化合物,其中相对含量较高的成分有1,8-桉叶油素、a-蒎烯、β-蒎烯、1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1,4-环己二烯和异丙基甲苯;刚果12桉叶挥发油的主要成分为萜类和萜醇类化合物,其中相对含量较高的成分有a-蒎烯、1,8-桉叶油素、γ-萜品烯、β-蒎烯、异蒲勒醇和α-松油醇。广林九号桉叶挥发油的主要成分为萜类和萜醇类化合物,其中相对含量较高的成分有1,8-桉叶油素、a-蒎烯、乙酸松油酯、1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1,4-环己二烯和β-蒎烯;尾叶桉U6挥发油的主要成分为萜类和萜醇类化合物,其中相对含量较高的成分有1,8-桉叶油素、a-蒎烯、γ-萜品烯、β-蒎烯、α-松油醇和乙酸松油酯;广州一号桉树叶挥发油相对含量较高的成分为1,8-桉叶油素(49.51%)、a-蒎烯、γ-萜品烯、乙酸松油酯、β-蒎烯、1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1,4-环己二烯和α-松油醇。 (2)对桉树叶总黄酮的提取工艺进行了优化,利用单因素实验确定乙醇浓度、提取温度、料液比和提取时间四个因素的单因素最佳值,然后通过单变量多因素方差分析来确定对总黄酮提取率影响最大的因素来进行BBD(Box-Behnken Design)响应面优化,从而确定它们的最优组合。实验结果显示,最佳工艺为液料比40:1,提取温度80℃,提取时间3h,乙醇浓度70%。 (3)采用体外抗菌法,研究了桉叶挥发性成分对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抗菌效果,结果显示:不同品种的桉叶挥发油对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌都具有一定的抑菌作用,且最小抑菌浓度存在差异。窿缘桉、广林九、刚果12号桉、尾叶桉U6和广州一号桉挥发油对大肠埃希菌的最小抑菌浓度分别为6.25%、12.5%、6.25%、12.5%和6.25%,窿缘桉、刚果12号桉、广州一号桉挥发油抑菌能力大于广林九和尾叶桉U6.对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为6.25%、6.25%、12.5%、12.5%和25%,抑菌能力大小顺序为:窿缘桉,广林九>刚果12号桉,尾叶桉U6>广州一号桉。 (4)采用DPPH·(二苯基苦基苯肼自由基)清除法分别评价了5种桉叶挥发性成分的抗氧化性能。五个不同品种挥发油清除DPPH·的能力大小顺序为:窿缘桉挥发油>刚果-12号桉挥发油>广州一号桉挥发油>U6挥发油>广林-9挥发油。 (5)采用三种不同的自由基清除法对桉叶不同有效部位的清除能力进行研究。在DPPH自由基清除试验组中,不同有效部位的清除能力大小为:乙酸乙酯部位>正丁醇部位>三氯甲烷部位>水溶性部位>石油醚部位,都要弱于阳性对照品VC。在O2-自由基清除试验组中,各有效部位的清除能力大小排列顺序为:石油醚部位>三氯甲烷部位>正丁醇部位>乙酸乙酯部位>水溶性部位。在·OH自由基清除试验组中,各部位清除能力大小排列顺序为:乙酸乙酯部位>水溶性部位>正丁醇部位>石油醚部位>三氯甲烷部位,但清除能力较对照品VC低。
广东桉树叶;化学成分;抗菌特征;抗氧化活性
广东药学院
硕士
中药学
李明亚
2013
中文
R284.1
76
2014-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）