川芎嗪对IPF大鼠脆性位点基因WWOX、FHIT影响的研究
目的： 本研究采用目前较为通用的博莱霉素气管内注射制作的大鼠肺纤维化模型，分离培养肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞，借助于细胞学、分子生物学、免疫组织化学等实验方法，研究该细胞内染色体脆性位点基因WWOX、FHIT表达的改变，为今后开展肺间质纤维化的基因治疗提供理论依据。 方法： 健康清洁级SD雄性大鼠18只随机分为假手术组、模型组及川芎嗪预防用药组。各组动物适应性喂养一周后分别进行手术。假手术组暴露气管后即缝合切口，模型组及川芎嗪组则经气管缓慢注入博莱霉素（5mg/kg）后同样缝合切口。川芎嗪组于术后第2天开始灌胃给药，给药剂量为20mg·kg-1·d-1。实验期间，大鼠自由饮水和进食，并分别于给药后7d、14d和28d，每组随机取2只大鼠处死，提取肺泡Ⅱ型上皮细胞进行原代培养。对体外培养72h后的肺泡Ⅱ型上皮细胞利用免疫组织化学方法分析WWOX和FHIT蛋白的表达,RT-PCR技术检测WWOX、FHIT基因的改变情况。 结果： 1、假手术组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内WWOX和FHIT蛋白表达均呈现强阳性。与假手术组比较，造模7d后模型组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内WWOX和FHIT蛋白表达无显著变化(P＞0.05)。而用药14、28d后，WWOX和FHIT蛋白表达则明显下降(P＜0.05)。川芎嗪组与模型组相比有显著上调(P＜0.05)。 2、用药7d后，模型组、川芎嗪组与假手术组WWOX和FHIT基因mRNA表达无明显差异(P＞0.05)，模型组与川芎嗪组相比亦无明显差异(P＞0.05)；用药14d后，模型组WWOX和FHIT基因mRNA表达比假手术组明显降低(P＜0.05)，川芎嗪组比模型组则显著升高(P＜0.05)；用药28d后的结果与用药14d后的结果相似。 结论： 1、在肺间质纤维化过程中存在着染色体脆性位点基因WWOX和FHIT的改变。 2、川芎嗪可以在一定程度上抑制染色体脆性位点基因WWOX和FHIT的改变，从而可以起到一定的防治肺间质纤维化的作用。
川芎嗪;肺纤维化;动物模型;WWOX基因;FHIT基因;药理作用
河北大学
硕士
药理学
段斐
2013
中文
R974;R563
54
2013-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）