蒙古沙冬青AmCAT和AmZF基因的克隆与功能分析
前人研究表明，过氧化氢酶(Catalase，CAT)和锌指型转录因子(zinc finger transcription factor，ZF)在植物响应和抵抗多种非生物逆境中起重要作用。本论文从强抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到AmCAT和AmZF的cDNA，并对二者在高盐、低温和干旱胁迫下的表达进行了动态分析，然后将它们分别转入拟南芥进行了功能鉴定，主要研究结果如下： (1)用RT-PCR方法扩增到AmCAT的编码区cDNA，由1479bp组成，推测其编码蛋白含493个氨基酸残基，分子量为56.86 KDa，等电点为7.25，可能为亲水性蛋白，定位在过氧化物酶体中。 (2) AmCAT的表达受高盐、低温和干旱胁迫的显著诱导，尤其在干旱和盐胁迫下其表达量持续上调。 (3)将AmCAT编码区cDNA片段连接到植物表达载体pCAMBIA3301的35S启动子之后，利用农杆菌介导法转化拟南芥。通过对转基因株系在干旱、高盐和外源ABA等处理下进行表型鉴定，发现AmCAT在耐旱和耐盐性中起正调节作用，而对外源ABA敏感性起负调节作用。 (4)用RT-PCR方法扩增到AmZF的编码区cDNA，由441bp组成，预测其编码蛋白含146个氨基酸残基，分子量为16.31KDa，等电点为9.14，可能为亲水性蛋白，主要定位在细胞质中。 (5) AmZF的表达受干旱、低温和高盐胁迫的显著诱导，尤其在干旱、低温胁迫下其表达量持续上调。 (6)将AmZF编码区cDNA片段连接到植物表达载体pCAMBIA3301的35S启动子之后，利用农杆菌介导法转化拟南芥。在干旱、高盐和外源ABA等处理下对转基因株系进行表型鉴定，证明AmZF在耐旱和耐盐中起正调节作用，而对外源ABA不敏感。
过氧化氢酶;蒙古沙冬青;锌指型转录因子;抗逆性能
内蒙古农业大学
硕士
遗传学
王茅雁
2013
中文
S792.99
64
2013-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）