余甘子叶提取物对荷瘤小鼠抑瘤及免疫功能影响的研究
目的：研究余甘子叶提取物的抗肿瘤作用，并探讨其对荷瘤小鼠免疫功能的影响，为将余甘子叶开发为治疗肿瘤的药物提供实验依据。 研究方法：1.采用渗漉及柱层析洗脱萃取法提取分离余甘子叶提取物。2.采用MTT法检测余甘子叶提取物对人肝癌细胞株Bele7404、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901和小鼠肝癌细胞株H22细胞增殖的抑制作用。3.通过灌胃给药观察余甘子叶提取物的急性毒性。4.余甘子叶提取物按照高、中、低剂量灌胃给予H22荷瘤小鼠，观测其对小鼠瘤重的抑瘤率。5.剖取小鼠脾脏和胸腺称重，测定余甘子叶提取物对小鼠免疫器官的影响；采用小鼠碳粒廓清法，测定其对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能的影响；采用乳酸脱氢酶（LDH）测定法，测定其对小鼠自然杀伤（NK）细胞活性的影响；采用MTT法检测其对经Con A或LPS诱导的小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响；采用血清溶血素测定法，测定其对小鼠体液免疫功能的影响；用ELISA法测定其对小鼠血清中细胞因子IL-2和TNF-α含量的影响。 研究结果：1.余甘子叶经渗漉提取及柱层析洗脱萃取分离得到余甘子叶提取物，其得率为2.22％，含量为50.27%；2. MTT法检测结果显示，与空白对照组比较，不同浓度的余甘子叶提取物对人肝癌细胞株Bele7404、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901和小鼠肝癌细胞株H22均有一定的抑制作用，其中浓度为20μg/mL、40μg/mL和80μg/mL的余甘子叶提取物对四种肿瘤细胞株的抑瘤率差异均有显著性（p<0.05）。3.急性毒性结果显示余甘子叶提取物经口灌胃给药的LD50为9.911g/kg，95%可信区间为6.807g/kg~15.832g/kg。4.体内实验结果显示，余甘子叶提取物具有一定的抑制肿瘤生长作用，其中余甘子叶提取物高剂量组瘤重显著低于模型对照组(p<0.05)，抑瘤率达到33%。5.与模型对照组比较，余甘子叶提取物各剂量组均不同程度地提高荷瘤小鼠脾和胸腺指数，其中高剂量组与模型对照组比较能明显提高荷瘤小鼠脾指数（p<0.05）、胸腺指数（p<0.05）；余甘子叶提取物高剂量组可明显升高小鼠廓清指数（p<0.05）、吞噬指数（p<0.05）；余甘子叶提取物高、中剂量组能明显增加NK细胞活性（p<0.05）。但余甘子叶提取物各剂量组对经Con A或LPS分别诱导的T、B淋巴细胞增殖均无显著的促进作用；余甘子叶提取物各剂量组对小鼠血清溶血素含量影响不显著；余甘子叶提取物高、中剂量组可以显著增高血清中IL-2、TNF-α的含量（p<0.05）。 结论：余甘子叶提取物具有较强的抗肿瘤以及促进荷瘤小鼠免疫功能，尤其是非特异性免疫的作用。
余甘子叶提取物;抗肿瘤机制;免疫功能;动物模型
广西中医药大学
硕士
中西医结合
钟振国
2010
中文
R286.91
72
2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）