两株植物内生真菌次级代谢产物及其抗肿瘤活性研究
植物内生真菌（Endophytic fungi）是指在植物寄主中度过全部或者近乎全部生活周期而不使寄主表现任何症状的一类真菌。它是生活在植物组织内的一类微生物，是植物生态系统中的天然组成成分。植物内生真菌可以产生与宿主植物相同或相近的具活性的代谢产物，因而成为天然药物研究与开发的重要来源。1993年，美国科学家Stierle等首次从短叶红豆杉(Taxus breviflia)中分离得到一株能够代谢出紫杉醇的植物内生真菌—Taxomyces andreanae，这一发现掀起了一场从植物中分离内生真菌并对其药理活性和机理研究的热潮。在后来的研究当中，发现植物内生真菌次级代谢产物具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化、降血糖、免疫抑制、抗病毒等等活性。因此，对内生真菌药用活性代谢产物在作为野生药用植物替代资源以及新型药物研制方面发挥了巨大作用。本论文所研究的对象菌株Guignardia mangiferae来源于罗浮山土茯苓；而菌株Endomelanconiopsis则来源于罗浮山五指毛桃，两株菌株均来源于广东特色药材。对研究以及开发我国南方药用植物内生真菌具有深远意义。对上述两株植物内生真菌进行大规模发酵和次级代谢产物研究，并对分离得到的化合物进行抗肿瘤活性测试评价。 采用常规的硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、反相硅胶柱层析、制备薄层以及重结晶等各种分离手段分离得到单体化合物。利用各种现代波谱技术一维二维核磁(IR、UV、EI-MS、HR-ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、HSQC、1H-1H COSY、HMBC等)并结合单晶衍射等各种方法从两株菌株发酵提取物中鉴定了43个化合物的结构(新化合物14个)。其中，从菌株Guignardia mangiferae代谢产物中分离并鉴定了30个化合物，其中10个化合物为杂合萜类新化合物（Guignardones D~M），2个新天然产物；从Endomelanconiopsis发酵液提取物中分离鉴定了13个化合物，其中4个新化合物（Endomelanconiopsis A-D）。 对以上分离得到的化合物进行抗肿瘤体外细胞毒活性初步评价。各种化合物呈现不同的抑制程度。具体如下：从菌株Guignardia mangiferae中，化合物GY16、GY17、GY18抗肿瘤活性较好，但它们是塑化剂类化合物，不仅对癌细胞具有杀伤，对正常细胞也具有杀伤，因此不具备开发价值。10个新化合物对SF-268细胞均具有选择性的抑制作用，其中化合物GY4*对MCF-7表现良好的抑制活性。从Endomelanconiopsis中，EY1*、EY5、EY12、EY13对三种肿瘤细胞均表现出较好的活性。特别是EY1*为新化合物，对以后的开发研究具有重要的价值。
植物内生真菌;次级代谢产物;抗肿瘤活性;抑制程度
广东药学院
硕士
药物化学
张德志;章卫民
2012
中文
R284;R285.6
126
2013-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）