红松松塔多糖分离纯化及生物活性研究
红松（Pinus koraiensis）系松科（pinaceae）松属（Pinus）植物，是我国东北部地区重要的松属树种。本文从红松松塔多糖的提取及纯化入手，在研究松塔多糖理化性质和单糖组成的基础上，探讨了松塔多糖的生物活性。 采用热水浸提法对松塔多糖进行提取，在单因素的基础上采用三因素三水平的正交实验对提取工艺进行优化，确定了最佳的工艺参数，即浸提温度100℃、料液比1:12、浸提时间4 h，多糖提取率达到最高，为15.2 mg·g-1。同时利用固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术分析了红松松塔挥发性成分，鉴定出66种组分，主要为单萜和倍半萜类成分。 系统研究了松塔粗多糖的脱蛋白和脱色工艺，采用酶法和三氯乙酸法进行松塔多糖脱蛋白工艺的研究；采用过氧化氢法和活性炭进行松塔多糖脱色工艺的研究。在脱蛋白试验中，酶法脱蛋白的最佳工艺参数：pH值4.5，酶添加量0.10％，酶解温度60℃及酶解时间2.0 h，蛋白脱除率达83.42%；三氯乙酸法脱蛋白的最佳工艺参数：样液:三氯乙酸为1:3、震荡时间20 min、三氯乙酸浓度6%，蛋白脱除率达72.41%。在脱色试验中，过氧化氢法脱色的最佳工艺参数：过氧化氢浓度6%、时间60 min、温度80℃、pH值11，脱色率为95.50%；活性碳法脱色的最佳工艺参数：活性炭添加量1.5%、时间60 min、温度50℃、pH值3，脱色率达74.52%。根据上述实验结果，本研究最终采用三氯乙酸法对多糖进行脱蛋白，过氧化氢法对多糖进行脱色。 测定了纯化后的松塔多糖的理化性质，并利用凝胶色谱对多糖的纯度进行测定。通过薄层色谱法和气相色谱-质谱联用法确定松塔多糖的单糖组成，结果表明松塔多糖由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖组成，其摩尔比为1.34:1.73:0.39:2.59:3.61:8.66。 最后，分别对松塔多糖进行了抑菌和抗氧化活性的研究。在抑菌实验中，松塔多糖对大肠杆菌、沙门氏菌及志贺氏菌均有一定的抑制作用，多糖浓度与对大肠杆菌和沙门氏菌的抑制作用存在明显的量效关系；在抗氧化活性研究中，松塔多糖对ABTS自由基具有一定的清除能力，IC50约为28 mg·mL-1，松塔多糖对Fe2+具有一定的鳌合能力，IC50约为78 mg·mL-1。
红松松塔多糖;提取工艺;生物活性;理化性质;抑菌实验
哈尔滨工业大学
硕士
生物化工
杨鑫
2010
中文
R284.2
87
2013-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）