玻璃体内注射环氧化酶-2抑制剂对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的抑制作用及其机制
研究背景：脉络膜新生血管（CNV）在多种眼部疾病中可以导致视力的严重损害，最常见伴有CNV的疾病有年龄相关性黄斑变性（AMD），血管纹样改变（AS），病理性近视和眼假组织胞浆菌病综合症（POHS）等。新生血管源自于脉络膜毛细血管层，突破Bruch膜形成黄斑下新生血管膜。新生血管是脆弱和易渗漏的，易导致出血或渗出，这些都损害了光感受器细胞，并且这些增生血管能够形成纤维瘢痕，从而导致视网膜功能不可逆损害和视力丧失。CNV生成是局部促血管生成因子与抑血管生成因子失衡所致。血管内皮生长因子（VEGF）是目前已知最强的促血管生成因子，能够刺激内皮细胞增生和增加血管内皮细胞的渗透性。诱导型环氧化酶（COX-2）已被证实能够调节VEGF，并且在人类和实验性肿瘤中COX-2是一种重要的促血管生成因子。COX-2在AMD患者CNV中和激光诱导的小鼠CNV中均有表达，且选择性COX-2抑制剂能够抑制CNV，但尚存争议。选择性COX-2抑制剂—塞来昔布是唯一被美国食品和药品管理局（FDA）批准用于家族性多发性腺癌（FAP）患者的非甾体抗炎药。研究选择性COX-2抑制剂—塞来昔布玻璃体内注射能否抑制激光诱导的大鼠CNV及其机制，有助于揭示CNV生成机制，并为CNV相关疾病的治疗提供新的思路。 目的：观察玻璃体内注射塞来昔布对激光诱导的BN大鼠CNV的抑制作用，并探索其机制。 方法：532nm激光诱导实验性BN大鼠CNV。激光光凝后，立即将6只大鼠随机分为给药组（n=3）和对照组（n=3），分别玻璃体内注射1mg/ml塞来昔布10μl和0.01MPBS10μl，14d后行HE染色（n=3）和脉络膜铺片（n=3），分别检测CNV的厚度和面积。将33只BN大鼠随机分为正常对照组（6只）、光凝后1d组（6只）、光凝后3d组（6只）、光凝后7d组（9只）和光凝后14d组（6只）。光凝后7d，采用免疫组织化学染色检测COX-2和VEGF在CNV中的表达特征（n=3）。WesternBlotting（n=3）和RT-PCR（n=3）分别检测正常对照组和光凝后1d、3d、7d、14d时，COX-2和VEGF蛋白及mRNA表达时相的变化。激光光凝后，将12只大鼠随机分为给药组（n=6）和对照组（n=6），分别玻璃体内注射1mg/ml塞来昔布10μl和0.01MPBS10μl，7d后WesternBlotting（n=3）和RT-PCR（n=3）检测给药组和对照组COX-2mRNA和VEGF蛋白及其mRNA。 结果：光凝后14d，给药组与对照组比较，CNV厚度和面积明显减小（P<0.01）。COX-2与VEGF在CNV中的血管内皮细胞和基质细胞中高表达，并且COX-2及其mRNA的表达早于VEGF及其mRNA的表达，COX-2与VEGF表达高峰与正常对照组之间比较明显升高（P<0.01）。光凝后7d，给药组与对照组比较，VEGF及其mRNA表达下降（P<0.05），而COX-2mRNA无明显变化（P>0.05）。 结论：玻璃体内注射塞来昔布能够抑制激光诱导的大鼠CNV的厚度和面积。COX-2在激光诱导的大鼠CNV生成早期表达上调，通过调控VEGF表达而起重要作用。
玻璃体内注射;环氧化酶-2抑制剂;激光诱导;脉络膜新生血管;抑制作用
第四军医大学
硕士
眼科学
王雨生
2009
中文
R773.4
60
2012-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）