融合蛋白PML/RARA与转录因子PU.1之间蛋白质-蛋白质相互作用的研究
急性早幼粒细胞性白血病（Acute Promyelocytic Leukemia, APL）是急性髓细胞白血病的一个独特亚型（FAB分型为AML-M3），95％～99％的APL患者携带t(15;17）染色体易位。该易位产生的融合基因编码的融合蛋白PML/RARA是APL发病的分子基础，结构中包含野生型PML的RBCC结构域和野生型RARA的DNA结合域，能够通过与其他转录因子（如AP1、Sp1和GATA2等）相互作用，抑制其对下游靶基因的调控，将正常造血分化阻滞于早幼粒细胞阶段，导致早幼粒细胞性白血病的发生。
以往的研究表明，PML/RARA的表达和PU.1的表达之间存在一定的相关性，PU.1的表达随着PML/RARA的表达量的增加而下降，提示PU.1的表达的改变与APL的发生密切相关。根据前期本实验室利用ChIP-on-chip和相关生物信息学分析研究PML/RARA 转录调控机制的结果，发现PML/RARA潜在的靶基因的调控区域存在显著富集的PU.1结合位点，提示PML/RARA可能通过某种机制与髓系造血至关重要的转录因子PU.1存在相互作用，随之选择性的抑制了PU.1下游调控的对于粒系成熟必需的靶基因的表达。因此剖析PML/RARA与PU.1的相互作用方式及机制，对于明确PML/RARA的复杂转录调控机制，深入理解PU.1在APL发生过程中所扮演的角色有重要意义。
因此，本课题以揭示融合蛋白PML/RARA 与转录因子PU.1 之间的蛋白质-蛋白质相互作用为出发点，利用多种生物学技术手段，明确APL 中PML/RARA 与PU.1 的作用模式。结果表明：1）在APL 细胞株和APL 病人细胞中，PML/RARA 与PU.1 在细胞核内部分共定位；2）APL 细胞中，PML/RARA 融合蛋白与转录因子PU.1 存在蛋白质-蛋白质相互作用；3）PML/RARA 融合蛋白选择性地被转录因子PU.1 招募，在DNA 的参与下形成了更大的DNA-蛋白质复合体。以上研究结果不仅能够从细胞学水平上解析PML/RARA 与PU.1 的相互作用，而且为PML/RARA 与PU.1 是以怎样的方式影响了PU.1 的调控过程，从而促进APL 的发生提供可靠的实验证据；而且进一步完善了APL 白血病发生的详细分子机制。
急性早幼粒细胞性白血病;蛋白质-蛋白质相互作用;转录因子;融合蛋白
上海交通大学
硕士
遗传学
张济
2009
中文
R733.71
30
2012-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）