琐琐葡萄提取物对小鼠巨噬细胞细胞因子及Toll样受体表达的影响
目的：分别利用LPS、Poly(I:C)模拟外源性细菌、病毒感染，探讨琐琐葡萄提取物多糖(VTP)、黄酮(VTF)和水提原液(VTY)对RAW264.7细胞分泌TNF-α，IFN-β的影响及其对细胞表面TLR4、TLR3基因表达的影响。方法：通过对RAW264.7型细胞生物学形态的观察，生长曲线的绘制掌握其一般生物学活性；分别用6.25、12.5、25、50、100、200、400 μg/ml的VTP、VTF和VTY, 0.01、0.1、1、10 μg/ml的LPS，10、25、50、100 μg/ml的Poly(I:C)作用于RAW264.7细胞，48 h后采用MTT法测定各组细胞的OD值并计算VTP、VTF和VTY的TC50；采用ELISA法测定LPS和Poly(I:C)最适刺激浓度和VTP、VTF和VTY干预其分泌细胞因子的最适干预浓度；采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR3、TLR4基因表达情况。结果：(1)琐琐葡萄提取物VTP、VTF和VTY对RAW264.7细胞的TC50分别为599.501、1354.285和1546.094 μg/ml；(2)10 μg/ml，24 h作为LPS最适刺激条件诱导炎症；与LPS模型组比较VTF及VTY所有剂量组对TNF-α炎症因子的抑制有统计学差异（P<0.01)，而VTP(6.25、12.5、50μg/ml)组和25μg/ml剂量组对TNF-α炎症因子的增加有统计学意义（P<0.01，P<0.05)；(3)以100 μg/ml 刺激24 h作为Poly(I:C)诱导RAW264.7细胞产生IFN-β的最适条件；与Poly(I:C)模型组相比，VTF(6.25、12.5、25μg/ml)和VTY所有剂量组对IFN-β的抑制均有统计学意义(P<0.01)；而VTP(6.25、12.5、50μg/ml)组对IFN-β的增加有统计学意义（P<0.01)(4)与细胞对照组比较，不同处理组TLR3和TLR4基因表达的上调均具有统计学意义(P<0.01)；与LPS刺激组相比，VTF干预组的TLR3和TLR4基因表达的下降均有统计学意义(P<0.01，P<0.05)；与Poly(I:C)刺激组比较，VTF对TLR3基因的下调有统计学意义(P<0.01)。结论：VTF在细胞因子水平和基因水平均显示出良好的抗炎、抗毒病效应；VTP可能有激活巨噬细胞的作用，通过促进炎症因子释放而发挥调节机体免疫功能的作用；VTY在体外细胞因子水平有一定的抗炎、抗病毒作用。
琐琐葡萄;黄酮;多糖;水提原液;Toll样受体;基因表达
新疆医科大学
硕士
卫生毒理学
马龙
2009
中文
R-332;R394-33
2012-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）