先天性白内障致病基因HSF4功能研究
HSF4 属于热休克因子（HSF）家族，HSF在细胞遭受生存压力时会激活其靶基因。它的突变可以引起常染色体显性和隐性的先天性白内障。HSF4b蛋白是HSF4在晶状体中主要的剪切本。迄今为止，关于HSF4b蛋白的突变导致先天性白内障的机理还不清楚。
本实验室自HLE（人晶状体上皮细胞）细胞中得到了HSF4b蛋白的cDNA。我将其重组进pEGFP-N1载体，转染HLE细胞，使用共聚焦显微镜观察发现HSF4b在细胞核内呈点状聚集。因其定位方式与剪接体类似，而且文献报道剪接体中的SC35可与某些转录因子相互作用，我们假设同为转录因子的HSF4b 也可能与之相互作用。
但将HSF4b和SC35 接上不同的荧光标记载体，共转HLE细胞，发现它们不是共定位。而后，我选择了另外两个亚细胞核结构中的标记分子——coilin和γ-H2AX，它们分别是卡侯氏体和DNA 损伤修复位点的标记分子，但免疫荧光实验证实它们与HSF4b 也不是共定位。对于HSF4b 这种全新的定位方式，我们将尝试其他的Nucleardomains，测试它们与之是否共定位，如果能共定位，我们可以利用这种已知Nucleardomains的研究成果，通过它来发现HSF4b的功能。如果证明HSF4b不与所有的Nuclear domains 共定位，这说明它代表了一种新的Nuclear domains，我们将尝试其他方法寻找HSF4b 相互做用的蛋白或其他分子，理解这种新的Nuclear domains的功能，以及它在细胞和晶状体中的功能。
白内障;晶状体;上皮细胞;热休克因子4;共聚焦显微技术
华中科技大学
硕士
遗传学
任翔
2009
中文
R776.1
2011-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）