鱼废料制备低聚肽工艺研究
本文以低值鲢鱼及其废料为原料,采用双酶水解结合膜技术制备具有较高附加值的生物活性低聚肽,探讨了双酶水解过程中水解度与水解时间的关系模型,并对水解产物的抗氧化活性和血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性进行了初步研究。
单酶水解鲢鱼蛋白结果显示,Protamex、Alcalase和风味酶较适合鲢鱼蛋白酶解;单因素实验结果表明,Protamex、Alcalase和风味酶最佳水解条件分别为:最适底物浓度均4.5[%],最佳pH 7、7.5、7,水解时间180min、120min、120min,加酶量(酶与底物蛋白质量比)3[%]、3[%]、4[%],温度50℃、55℃、50℃,每种酶在最佳条件下水解度分别为:17.7[%]、20.2[%]、19.3[%],氮利用率分别为:86.1[%]、92.4[%]、92[%]。
在蛋白酶最佳水解条件下,以水解度(DH)、氮利用率和分子量分布为指标,通过单因素试验比较了3种双酶组合的水解效果,综合考虑确定Protamex、Alcalase为最佳双酶组合。此最佳水解体系下DH为21.9[%],氮利用率为95[%],分子量98[%]分布在1000Da以下。
探讨了Protamex、Alcalase双酶水解鲢鱼蛋白体系水解度与时间关系模型,确定了模型参数。经实验验证、数据拟合和理论推导,确定双酶恒温水解鲢鱼蛋白体系水解度DH与时间t关系符合模型:DH=1/bIn[1+a′b′t],其中参数a=1.03356e/s-0.19043,b=0.23449,e/s为加酶量与底物蛋白质量百分比。
对水解物抗氧化性和ACE抑制活性进行初步研究。结果表明各水解度下酶解液均表现出较好的清除羟基自由基(?OH)能力,其中DH20[%]组分表现出最佳清除率;对于总抗氧化性,当水解度为25[%] 时其总抗氧化能力较差,DH5[%]总抗氧化性最佳;各水解度下水解液对ACE均有抑制作用,以DH20[%]的水解液ACE抑制率最高。
研究不同微滤膜和纳滤膜对鲢鱼蛋白水解液的影响,确定微滤膜Ⅱ和纳滤膜Ⅱ效果较好。数据显示微滤膜Ⅱ除杂率好,低聚肽纯度提高4[%]左右;纳滤膜Ⅱ使酶解液浓缩9.3倍,纯度提高到94.2[%]。
低聚肽;鱼废料;双酶水解结合膜;抗氧化活性;血管紧张素转化酶;蛋白酶;微滤膜
湖北工业大学
硕士
化学工艺
万端极
2010
中文
TQ914.2;TB383
68
2011-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)