植物抗菌活性筛选及活性物质分离
本研究以采自广西桂东北及桂东南的24个科30个属共33种植物样品为筛选对象，采用菌丝生长速率法分别测定了其甲醇粗提物（浓度为10 g/L）对西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. Sp. Niveum，芒果叶枯病菌Pestalotia calabae Westond，甘蔗凤梨病菌Thielaviopsis paradoxa (de Seynes) V. Hohnel，香蕉炭疽病菌Glorosprium musarum(Berk ＆ Curt）Arx，梨黑斑病菌Alternaria kikuchiana Takana；梨褐斑病菌Mycosphaerella sentina(Fr.) Schroeter，柑橘疮痂病菌Sphaceloma fawcettii Jenkins的生物活性，结果表明：石菖蒲具有广谱抗菌活性，对供试的7种植物病原真菌菌丝生长均有100％的抑菌活性；阔叶十大功劳对芒果叶枯病菌的抑菌率为94.78％；多数供试样品对梨黑斑病菌菌丝生长具有明显的抑制作用，细叶桉、油茶、荷木、一叶楸、盐肤木根的抑菌率为100％，大叶桉和漆木也在90％以上，其中荷木提取物对梨黑斑病菌的活性最高，浓度为2 g/L时，抑菌率仍达100％；石楠藤对香蕉炭疽病菌菌丝生长的活性最强，其抑菌率为91.95％；颠茄果对柑橘疮痂病菌菌丝生长抑制率为95.05％；细叶桉、油茶、柠檬桉、驳骨丹、木防己、颠茄果、黄檀、盐肤木根、五叶瓜藤、一叶萩、三桠苦、阔叶十大功劳、鸭脚木、臭辣树、桃叶石楠、箭根薯、无根藤、石楠藤对至少一种病原菌菌丝生长有60％以上的抑制作用。毛果巴豆、羊角拗、海金沙、盐肤木叶、钩吻、箭根薯和猕猴桃则对至少一种病原菌菌丝生长表现出促进作用。
对高活性的13种植物测定其毒力，石菖蒲对7种病原真菌的致死中浓度均大于1.0 g/L。一些植物样品对某种病原菌抑菌活性极高，荷木对梨黑斑病菌的抑菌活性最高，其甲醇粗提物的致死中浓度为0.0532 g/L；此外，油茶对甘蔗凤梨病菌及梨黑斑病菌的致死中浓度分别为0.8374 g/L和0.6596 g/L，驳骨丹对甘蔗凤梨病菌为0.7320 g/L，颠茄对香蕉炭疽病菌的致死中浓度为0.9012 g/L。选择荷木及石菖蒲进一步研究其有效成分。采用固-液萃取法对荷木的甲醇粗提物用石油醚、氯仿及正丁醇萃取，生测结果表明梨黑斑病菌的抑制物质主要集中在正丁醇萃取物中，1g/L浓度处理72h，对梨黑斑病菌的抑菌率为99.35％。采用液-液分配萃取法对石菖蒲用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，生测结果证明对7种病原菌的活性物质集中在石油醚萃取物中，5 g/L处理72h，对7种病原菌抑制率均为100％，其他萃取层基本没有活性或活性低。对荷木的正丁醇层进行柱层析分离，得153个流分，流分HM1-147~153有较好的抑菌活性，0.2 g/L浓度下，24h、48h、72h对梨黑斑病菌抑制率分别为86.67％、80.40％和81.42％。其余组分对梨黑斑病菌基本没有活性，有些组分表现出促进菌丝生长作用。对HM1-147-153进行聚酰胺柱层析，得40个流分，HM2-1、HM2-2~3都具有较好的活性，在0.1 g/L的浓度下，HM2-2-3、HM2-1对梨黑斑病菌的抑制率分别为89.57％、77.73％，对甘蔗凤梨病菌抑制率分别为71.43％和67.57％。HM2-4-17对甘蔗凤梨病菌有一定的抑制活性，抑菌率为54.65％，其他组分对两种病菌基本没有活性。对石菖蒲的石油醚层进行柱层析分离，得63个流分，生测结果表明Scp1-5~6、Scp1-7~15在2 g/L浓度下，对7种病原菌72h抑制率均为100％，Scp1-24~48 、Scp1-55~62对7种病原菌也有一定的抑制作用。Scp1-5~15进行柱层析分离，得14个流分，通过对梨黑斑病菌活性测定，发现组分Scp2-9~14活性最高，在1g/L浓度下抑菌率为100％，其余组分几乎无活性。组分Scp2-9~14对其余6种病原菌也有很高的活性，在0.5g/L浓度下，对梨褐斑病菌的抑菌率为86.09％，对其他6种病原真菌的抑菌率均为100％，证明活性物质存在于组分Scp2-9~14中。Scp2-9~14对甘蔗凤梨病菌和西瓜枯萎病菌的孢子萌发法也有抑制作用，浓度为0.4 g/L时，抑制率分别为98.81％和100％。用硅胶H对Scp2-9~14进行反复分离、纯化，得到一个纯的活性化合物。通过对其核磁共振波谱、质谱的解析，再与有关文献报道的数据进行比较，确定该化合物为：1,2-二甲氧基-4（2-丙烯基）苯。
生测结果表明，在0.3 g/L浓度下，对甘蔗凤梨病菌、芒果叶枯病菌、西瓜枯萎病菌、香蕉炭疽病菌、梨褐斑病菌、柑桔疮痂病菌、梨黑斑病菌72h抑菌率分别为100％、100％、100％、99.86％、91.00％、74.74％和79.92％。对上述7种病原菌的有效中浓度分别为0.1021 g/L、0.0997 g/L、0.0805 g/L、0.1503 g/L、0.1924 g/L、0.1853 g/L、0.1742 g/L。
野生植物;植物杀菌;抗菌活性
广西师范大学
硕士
野生动植物保护与利用
邓业成
2007
中文
Q949.96
2008-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）