过氧化物酶模拟及其应用研究
酶是生物体内产生的具有专一性和高效催化活性的生物催化剂，生物体进行的各种化学反应几乎都是在酶的催化下进行的，没有酶就没有生命。过氧化物酶是一类从生物体中提取出来的氧化还原酶，其以血红素为辅基，参与生命体的生理代谢，依据其催化作用的高效性、专一性和反应条件的温和性等特点，以辣根过氧化物酶(HRP)为代表，应用于分析化学、免疫化学等领域十分广泛。然而，由于天然HRP 容易失活，提取分离困难，价格昂贵，以及分子较大而不利于与抗原抗体结合，且标记过程复杂，因此，寻找能够替代HRP 的模拟酶和催化体系并探寻优良的氢供体底物以提高模拟酶催化反应的灵敏度和选择性是一个具有重要意义的研究领域。
本论文主要采用分子光谱研究手段，通过化学合成方法，合成了系列水溶性金属卟啉、金属酞菁等金属/有机复合物，并以其作为过氧化物模拟酶,研究酶催化反应特性；同时选择天然生物活性小分子氯化血红素（Hemin）及合成金属/有机复合物为模拟酶，研究其催化作用，建立酶催化反应方法；另外依据过氧化物酶对氢受体底物具有特异性而对氢供体底物特异性不甚严格的特性，选择不同类型的氢供体底物，探讨不同类型底物对酶催化反应所建立分析方法灵敏度和选择性的影响，并建立测定H2O2、葡萄糖的简便实用的分析方法，主要开展了以下几方面的工作：
1、合成了水溶性金属卟啉和带羧基、磺酸基取代基的金属酞菁类化合物，并对化合物进行了紫外-可见吸收光谱和红外光谱的分析；
2、以HRP 及Hemin 作对照，对不同模拟酶催化活性进行了比较，从中筛选出磺基铁酞菁和磺基铁卟啉具有较强的催化活性；选用不同底物类型对不同底物的酶催化反应进行了比较，并进行了反应机理的探讨；
3、以显色底物隐性结晶紫作为氢供体底物，磺基铁酞菁为过氧化物模拟酶，建立了检测H2O2含量的简便而灵敏的分析方法；
4、以磺基苯基铁卟啉作为过氧化物模拟酶，建立了检测葡萄糖含量的分析方法。
过氧化物酶;模拟酶;氢供体底物;生物催化剂;金属卟啉;酶催化反应
三峡大学
硕士
免疫学
黄应平
2004
中文
Q554.6;O643.32
39
2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）