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1 前言
1.1 课题的提出
1.2.1植物中的TCTP基因
1.3本研究的目的和意义
2. 材料与方法
2.1.1材料培养与处理
2.1.2总RNA分离、反转录
2.1.3引物设计
2.1.4 qRT-PCR
2.2 SlTCTP1基因表达对低温的时空响应
2.3 SlTCTP蛋白特征分析
2.3.1 SlTCTP蛋白结构与理化性质分析
2.3.2 SlTCTP1蛋白的亚细胞定位
2.4 SlTCTP1基因的功能鉴定
2.4.1 SlTCTP1基因超量表达Ailsa Craig番茄
2.4.2 获得SlTCTP1基因编辑材料
2.4.4 对转基因材料根系指标检测
2.4.5 SlTCTP基因超量表达番茄耐低温性分析
2.4.6 SlTCTP1互作蛋白验证
2.5.1特异性RT-PCR检测超表达与野生型嫁接体中mRNA移动性
2.6 SlTCTP1转基因材料代谢物分析
2.6.1 SlTCTP1转基因材料非靶向代谢物测定
2.6.2 SlTCTP1转基因材料靶向激素代谢物测定
3.结果与分析
3.1 SlTCTP1基因的组织特异性分析
3.2 SlTCTP1基因表达对低温的时空响应
3.3 SlTCTP1蛋白特征分析
3.3.1 SlTCTP1氨基酸序列比对和保守结构域鉴定
3.3.2 SlTCTP1蛋白高级结构预测
3.3.3 SlTCTP1/1和SlTCTP1/2蛋白理化性质预测
3.3.4 SlTCTP1蛋白的亚细胞定位
3.4 SlTCTP1基因的功能鉴定
3.4.1 SlTCTP1基因超量表达与基因编辑番茄阳性植株的鉴定
3.4.2 SlTCTP1基因超量表达与基因编辑番茄生长表型鉴定
3.4.3 SlTCTP1基因超量表达番茄耐低温性分析
3.4.4 SlTCTP1蛋白互作途径
3.5 SlTCTP1基因的长距离移动性鉴定
3.6 SlTCTP1转基因材料代谢物分析
3.6.1 SlTCTP1转基因材料非靶向代谢物测定
3.6.2 SlTCTP1转基因材料靶向激素代谢物测定
4.讨论
4.1 SlTCTP1基因对番茄植株生长发育的影响
4.2 SlTCTP1基因的长距离移动在植株生长发育中的作用
4.3 SlTCTP1基因在番茄低温响应中的功能
5. 全文总结及展望
参考文献
附录
附录Ⅰ 载体构建引物
附录Ⅱ 载体构建实验
附录Ⅲ 质粒图谱
附录Ⅳ SlTCTP1转基因材料靶向激素代谢物测定
致谢