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缩略语表
1前言
1.1酵母培养物
1.1.1后生元
1.1.2酵母后生元作用机制
1.1.3益生毕赤酵母
1.1.4酵母培养物应用现状
1.2肠道微生物研究进展
1.2.1肠道微生物组成
1.2.2肠道微生物影响因素
1.2.3肠道微生物功能
1.3益生菌
1.3.1益生菌功能
1.3.2乳酸菌生理功能及应用
1.3.3乳酸菌有氧代谢研究进展
1.4乳酸菌生物膜研究进展
1.4.1益生菌生物膜与肠道定植
1.4.2益生菌生物膜调控的机制
1.5仔猪早期断奶综合征
1.5.1仔猪早期断奶的应激因素
1.5.2仔猪早期断奶对肠道结构的影响
1.6研究目的和意义
2.1 实验菌株
2.2 主要分子生物学试剂
2.3 培养基及溶液配方
2.4主要仪器设备
2.5 毕赤酵母生理特性测定
2.5.1菌种鉴定及进化树分析
2.5.2生长曲线测定
2.5.3酵母最适温度及pH测定
2.5.4酵母胆盐及人工胃肠液耐受性
2.5.5 DPPH自由基清除活性的测定
2.5.6还原力的测定
2.5.7急性毒性实验
2.6 断奶仔猪验证实验
2.6.1试验动物
2.6.2仔猪饲养和样品采集
2.6.3仔猪腹泻率和腹泻指数统计
2.6.4病理切片分析
2.6.5粪便微生物基因组DNA提取
2.6.6细菌16S rDNA扩增子测序
2.6.7测序数据分析
2.6.8数据统计与分析
2.6.9短链脂肪酸检测
2.7毕赤酵母培养物调节肠道土著乳杆菌
2.7.1乳酸菌分离鉴定
2.7.2酵母发酵上清制备
2.7.3酵母发酵上清最佳发酵时间确定
2.7.4酵母发酵上清最适添加量分析
2.7.5酵母促生物质热稳定性分析
2.7.6酵母促生物质蛋白酶耐受性分析
2.7.7 生物膜检测方法
2.7.8酵母发酵上清代谢组特性分析
2.7.9酵母发酵上清分泌蛋白分析
2.7.10载体构建
2.7.11大肠杆菌DH5α感受态制备和热激转化法
2.7.12罗伊氏乳杆菌感受态制备及电转化
2.7.13 谷胱甘肽转移酶和细胞色素c的表达和纯化
2.7.14 罗伊氏乳杆菌FP13有氧呼吸能力测定
2.7.15RNA提取以及RT-qPCR
3结果与分析
3.1毕赤酵母益生特性
3.1.1菌种鉴定及系统发育树分析
3.1.2碳源利用分析
3.1.3酵母最适温度及pH
3.1.4酵母人工胃肠液及胆盐耐受性
3.1.5酵母胆盐耐受性
3.1.6 清除DPPH自由基能力
3.1.7还原力活性测定
3.1.8急性毒性实验
3.2毕赤酵母裂解物对断奶仔猪生长性能影响
3.2.1断奶仔猪生长性能统计
3.2.2断奶仔猪小肠组织切片观察
3.2.3断奶仔猪炎症因子检测
3.2.4微生物多样性分析
3.2.5微生物物种组成变化规律
3.2.6短链脂肪酸检测
3.2.7断奶仔猪检测指标与肠道菌群的关联分析
3.3酵母发酵上清调控肠道乳杆菌生长及生物膜研究
3.3.1仔猪粪便乳杆菌分离筛选
3.3.2酵母发酵上清促生最佳发酵时间及添加量确定
3.3.3酵母促生物质分子量大小分析
3.3.4酵母促生物质热稳定性及蛋白酶耐受性分析
3.3.5不同上清添加量对生物膜形成影响
3.3.6 酵母增强生物膜有效物质热稳定性分析
3.3.7添加酵母发酵上清增强抗氧化能力
3.3.8酵母发酵上清代谢组分析
3.3.9酵母发酵上清蛋白质谱分析
3.3.10双组份系统调控乳杆菌生物膜形成
4讨论与展望
4.1毕赤酵母益生特性及安全性
4.2毕赤酵母培养物提高断奶仔猪生长性能
4.3酵母培养物调控肠道乳杆菌
4.3.1断奶仔猪中乳酸菌的分布
4.3.2酵母培养物抗氧化作用
4.3.3酵母培养物对乳杆菌促生效应
4.3.4酵母发酵上清增强乳杆菌生物膜形成
4.4毕赤酵母培养物发酵工艺
论文创新点
参考文献
附录
研究生期间学术成果
致谢