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目录
符号说明
第一章绪论
1.1研究背景
1.2选题意义
1.3研究内容与技术路线
1.3.1研究内容
1.3.2 技术路线
1.4研究目标与创新点难点
1.4.1研究目标
1.4.2创新点
1.4.3难点
第二章文献综述
2.1 PAHs及其污染修复
2.2 微生物进行PAHs降解研究现状
2.2.1微生物对PAHs的厌氧降解途径
2.2.2微生物对PAHs的有氧降解途径
2.3微生物对PAHs的吸附
2.3.1趋化性对PAHs吸附的影响
2.3.2生物被膜对PAHs吸附的影响
2.3.3细胞表面疏水性对PAHs吸附的影响
2.4 PAHs跨膜转运机制
2.4.1 FadL转运系统
2.4.2 TonB转运系统
2.4.3 OmpW转运系统
2.4.4 内膜转运系统
2.5 微生物跨膜转运对PAHs修复的应用前景
第三章材料与方法
3.1 菌种、质粒和引物
3.2 实验试剂
3.3 实验仪器与设备
3.4 实验试剂及配方
3.5 菌种培养条件
3.6基因的敲除与回补
3.6.1基因敲除
3.6.2基因回补或过表达
3.6.3保守碱基定点突变
3.7 PAHs含量测定
3.7.1菲样品制备
3.7.2 HPLC检测菲含量
3.7.3 GC-MS检测苯并[a]芘含量
3.8启动子活性测定
3.9趋化性测定方法
3.10细胞表面疏水性测
3.13荧光共聚焦显微镜观察方法
第四章结果与分析
4.1 N. pentaromativorans US6-1编码一类新型 FadL亚家族通道蛋白
4.2 padL缺失不影响N. pentaromativorans US6-1在P5Y3与蔗糖中的生长
4.3 菲降解效率受到PadL的影响
4.3.1 padL表达影响N. pentaromativorans US6-1菲降解
4.3.2 N. pentaromativorans US6-1菲降解不受EcfadL异源表达的影响
4.4 PadL参与菲的跨膜转运
4.4.1 padL缺失影响对转运至胞内的菲含量
4.4.2 padL异源表达后E. coli获得了菲转运能力
4.5 padL缺失影响菲降解基因表达
4.6 padL缺失影响N. pentaromativorans US6-1对菲的趋化性
4.7 padL缺失影响细胞表面疏水性和生物被膜形成
4.8 PadL具有新的底物谱
4.8.1 PadL还参与苯并[a]芘等其他PAHs的转运
4.8.2 PadL不参与长链脂肪酸、长链烷烃及苯系物的转运
4.9 PadL底物结合口袋影响菲转运效率
4.9.1 PadL底物结合口袋及其关键活性位点的预测
4.9.2 结合口袋关键活性位点影响N. pentaromativorans US6-1菲降解能力
4.10 PadL 的异源表达增强了C. naphthovorans PQ-2 中的菲降解
第五章结论与展望
5.1结论
5.2展望
参考文献
附录
致谢
作者简介
1作者简历
2攻读硕士学位期间发表的术论文
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