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1 绪论
1.1 沙门氏菌的耐药状况
1.2 多粘菌素概述
1.3 多粘菌素B的抗菌机制
1.4 多粘菌素B的耐药机制
1.4.1 脂多糖的修饰
1.4.2 屏障系统或广谱外排泵的活化
1.4.3 生物膜
1.4.4 异质性耐药
1.5 研究目的及意义
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验试剂
2.3 实验仪器
2.4 相关试剂配制
2.5 实验方法
2.5.1 技术路线
2.5.2 多粘菌素药敏实验
2.5.3 沙门氏菌血清分型
2.5.4 mcr基因筛查
2.5.4 全基因组测序和数据组装
2.5.5 基因注释、质粒筛查、进化树构建
2.5.6 pkk223-eptC表达载体构建和表达
2.5.7 多粘菌素B诱导双相亚利桑那沙门氏菌
2.5.8生物膜测定
2.5.9细胞膜完整性检测
3 结果与讨论
3.1 多粘菌素B耐药特征分析
3.1.1 沙门氏菌对多粘菌素B的耐药性检测
3.1.2 沙门氏菌血清型鉴定
3.1.3 讨论
3.2 多粘菌素B耐药机制分析
3.2.1 mcr基因的PCR筛查
3.2.2 全基因测序、数据组装与注释
3.2.3 质粒分型和耐药基因筛查
3.2.4 SNP突变位点分析
3.2.5 eptC基因功能验证
3.2.6MLST分型和进化树构建
3.2.7 讨论
3.3 多粘菌素B体外诱导沙门氏菌的耐药机制探究
3.3.1 多粘菌素B体外诱导双相亚利桑那沙门氏菌
3.3.2 多粘菌素B体外诱导对生物膜形成能力的影响
3.3.3 诱导株形态学观察和自凝集能力评价
3.3.4 多粘菌素B体外诱导对细菌膜完整性的影响
3.3.5 诱导株全基因组测序及数据分析
3.3.6 讨论
4 总结和展望
参考文献
致谢
攻读学位期间的研究成果