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目录
1 前言
1.1灰葡萄孢的研究进展
1.1.1灰葡萄孢及其危害
1.1.2灰葡萄孢的分类地位和形态特征
1.1.3 灰霉病的病害循环
1.1.4灰葡萄孢的致病因子
1.1.5 灰葡萄孢的致病机理
1.1.6灰葡萄孢与寄主植物互作
1.1.7灰霉病的防治
1.2研究目的与意义
2 材料与方法
2.1菌株、植物材料及相关试剂
2.1.1菌株及植物材料
2.1.2实验试剂
2.1.3主要培养基和试剂的配制
2.1.4主要实验器材
2.2基因的生物信息学分析
2.3核酸的实验操作
2.3.1基因组DNA的提取
2.3.2质粒的提取
2.3.3总RNA的提取
2.3.4RT反转录反应和Real-Time PCR
2.4蛋白质的实验操作
2.4.1BcSSP2的原核表达
2.4.2农杆菌介导的瞬时表达和Western blot免疫印迹分析
2.5相关载体的构建
2.6PEG介导的灰葡萄孢原生质体转化
2.6.1灰葡萄孢原生质体的制备
2.6.2PEG介导的原生质体转化
2.7 生物学特性的实验研究
2.7.1菌落形态、菌核形成和孢子形成
2.7.2菌丝生长速度
2.7.3菌株的分生孢子产量
2.7.4抗逆性分析
2.7.5灰葡萄孢的致病力分析
2.8BcSSP2蛋白的亚细胞定位
2.9 BcSSP2蛋白毒性检测及植物抗性诱导
3 结果与分析
3.1BcSSP2基因的瞬时表达
3.2 BcSSP2的生物信息学分析
3.2.1BcSSP2的同源性分析及系统进化树的构建
3.2.2BcSSP2蛋白的结构分析
3.3BcSSP2的蛋白定位
3.3.1BcSSP2蛋白信号肽的分泌性
3.3.2BcSSP2蛋白的亚细胞定位
3.4BcSSP2基因的生物学功能分析
3.4.1BcSSP2基因的表达模式分析
3.4.2BcSSP2基因的功能研究
3.5BcSSP2蛋白性质的研究
3.5.1BcSSP2蛋白对不同植物的毒性研究
3.5.2BcSSP2蛋白的热稳定性及半胱氨酸残基对其毒性的影响
3.6 BcSSP2蛋白对植物抗性的影响
3.7 BAK1和SOBIR1负调控BcSSP2对本氏烟草的植物毒性
4 总结与展望
4.1总结
4.2展望
参考文献
致谢
攻读学位期间所发表的SCI论文