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脂肪干细胞治疗颞下颌关节骨关节炎的实验研究

何静
吉林大学
引用
目的:  通过提取兔脂肪间充质干细胞(ADSCs)并建立TMJOA疾病模型,将ADSCs同种同体注射至兔关节腔,评估骨结构参数、相关炎症因子的表达来探讨关节腔内注射ADSCs治疗TMJOA的有效性。  方法:  将27只家兔随机分为空白对照组、TMJOA建模组和ADSCs治疗组。提取培养治疗组的兔ADSCs,建模组和治疗组以碘乙酸钠法复制兔TMJOA模型。将1.0×106个ADSCs以60μl生理盐水重悬后对治疗组进行关节腔注射,建模组和空白对照组注射等量生理盐水,每周注射1次,注射2次后取兔颞下颌关节进行Micro-CT扫描,分析各组家兔髁突组织的骨体积分数(BV/TV)、骨表面积/骨体积比(BS/BV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)和骨小梁数(Tb.N);HE染色法观察各组家兔髁突病理形态;免疫组织化学方法检测各组家兔髁突组织中SRY相关高迁移率族盒基因9(SOX9)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达和定位并进行半定量分析;WesternBlot法检测各组家兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达。  结果:  Micro-CT扫描,与对照组比较,建模组家兔髁突组织的BV/TV、Tb.Th和Tb.N明显降低(P<0.05),BS/BV和Tb.SP明显升高(P<0.05);与建模组比较,ADSCs治疗组家兔髁突组织的BV/TV、Tb.Th和Tb.N明显升高(P<0.05),BS/BV和Tb.SP明显降低(P<0.05)。HE染色,对照组家兔髁突软骨表面光滑,层次清晰结构完整,纤维层、增生层、肥大层、钙化软骨层从外向内依次排列;建模组家兔髁突表面不规则,肥大层增厚,出现细胞缺失区和细胞簇状区;ADSCs治疗组家兔显示轻度炎症反应,肥大层略增厚。免疫组织化学染色,与对照组比较,建模组家兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与建模组比较,ADSCs治疗组家兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。WesternBlot法检测,与对照组比较,建模组家兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与建模组比较,ADSCs治疗组家兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。  结论:  1.Ⅰ型胶原酶消化法可以成功提取ADSCs,分离培养的ADSCs活性较高,可以成为良好的组织工程种子细胞。  2.碘乙酸钠化学诱导可以成功建立TMJOA疾病模型,各项检测指标显示诱导结果符合TMJOA动物模型诊断标准。  3.关节腔内注射脂肪干细胞能有效修复颞下颌关节骨关节炎的软骨破坏,减轻软骨损伤,减缓骨关节炎进展。

颞下颌关节;骨关节炎;脂肪干细胞;软骨修复

吉林大学

硕士

口腔临床医学

吴国民

2023

中文

R318.08

2023-08-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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