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目录
1 绪论
1.1 肥胖的定义及成因
1.2 内分泌干扰物及致肥因子
1.2.1 内分泌干扰物
1.2.2 致肥因子
1.3 增塑剂概述
1.4 乙酰柠檬酸三乙酯
1.5 研究内容与技术路线
1.5.1 研究内容
1.5.2 技术路线
2 ATEC暴露对肝细胞脂代谢平衡的影响
2.1 仪器与试剂
2.1.1 仪器
2.1.2 试剂及试剂盒
2.1.3 试剂配制
2.2 细胞培养
2.2.1 培养基配制
2.2.2 细胞培养方法
2.3 CCK-8细胞活性检测
2.3.1 检测原理
2.3.2 细胞培养
2.3.3 活性检测
2.4 LDH释放细胞毒性检测
2.4.1 检测原理
2.4.2 细胞培养
2.4.3 毒性检测
2.5 BODIPY 493-501 荧光染色
2.5.1 BODIPY 493-501 母液的试剂配制
2.5.2 显微镜定性分析
2.6 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
2.6.1 准备工作
2.6.2 试剂配制
2.6.3 细胞铺板
2.6.4 细胞药物处理
2.6.5 总RNA的提取（全程冰盒上操作）
2.6.6 RNA质量评估与逆转录
2.6.7 qRT-PCR
2.7 油红O染色
2.7.1 试剂配制
2.7.2 定性分析
2.7.3 定量分析
2.8 SCD1抑制剂处理
2.8.1 试剂配制
2.8.2 定性分析
2.8.3 定量分析
2.9 Scd1 siRNA干扰处理
2.9.1 siRNA引物合成
2.9.2 siRNA的配制
2.9.3 siRNA转染
2.10 数据图像处理
2.11 实验结果
2.11.1 ATEC对细胞的毒性作用
2.11.2 ATEC促进AML12细胞和L02细胞中的脂质积聚
2.11.3 ATEC影响AML12细胞中脂质相关基因的表达水平
2.11.4 SCD1抑制剂对AML12内脂质积聚的影响
2.11.5 siRNA敲低Scd1的表达能减少细胞内的脂质积聚
2.11.6 ATEC诱导L02细胞中脂质生成基因表达增高
2.11.7 SCD1抑制剂CAY10566对L02细胞的毒性作用
2.11.8 SCD1抑制剂CAY10566能减少L02细胞内的脂质积聚
2.12 本章小结与讨论
3 ATEC暴露对小鼠脂代谢平衡的影响
3.1 材料与方法
3.1.1 主要仪器
3.1.2 主要试剂
3.1.3 实验动物与环境
3.1.4 动物实验设计
3.1.5 血清指标检测
3.1.6 肝脏中甘油三酯（TG）检测
3.1.7 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
3.1.8 数据图像处理
3.2 小鼠饮食暴露ATEC的研究
3.2.1 ATEC长期暴露对小鼠体重、体脂的影响
3.2.2 ATEC长期暴露对小鼠血清中的脂质水平的影响
3.2.3 ATEC长期暴露对小鼠肝脏组织的影响
3.2.4 ATEC长期暴露对小鼠脂肪组织的影响
3.2.5 qRT-PCR结果分析
3.3 本章小结与讨论
4 总结与创新性分析
4.1 总结
4.2 创新性分析
5 未来展望
致谢
参考文献
附录