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第1章绪论
1.1 食用菌概述
1.1.1 食用菌简介
1.1.2 杏鲍菇营养价值
1.2 食用菌病害
1.3 杏鲍菇病害
1.3.1 杏鲍菇软腐病研究进展
1.3.2 杏鲍菇软腐病致病性研究现状
1.4 欧文氏菌属病原菌的致病机理研究
1.5 胞外多糖与致病性
1.5.1 胞外多糖
1.5.2 糖基转移酶与胞外多糖
1.6 研究目的和意义
第2章糖基转移酶wbnH2基因突变株及回补株构建
2.1 实验材料与仪器
2.1.1 供试菌株与质粒
2.1.2 试验试剂
2.1.3 试验仪器
2.1.4 主要培养基配置
2.1.5 引物的设计与合成
2.1.6 主要试剂配制
2.2 试验方法
2.2.1 糖基转移酶基因wbnH2缺失突变株的构建
2.2.2 糖基转移酶基因wbnH2回补株的构建
2.3 结果分析
2.3.1 质粒酶切及上下游同源臂扩增
2.3.2 三片段连接转化供体菌WM3064
2.3.3 Δ-wbnH2基因缺失突变株构建结果
2.3.4 回补株C-wbnH2构建结果
2.4 讨论
2.5 小结
第3章北京欧文氏菌野生型菌株与Δ-wbnH2菌株生物学性状分析
3.1 试验材料
3.1.1 供试菌株
3.1.2 试验试剂
3.1.3 试验仪器
3.1.4 主要培养基配置
3.2 试验方法
3.2.1 菌株活化及菌液制备
3.2.2 生长曲线测定
3.2.3 致病力测定
3.2.4 多糖含量测定
3.2.5 生物膜形成能力测定
3.2.6 运动性测定
3.2.7 黏附能力测定
3.2.8 数据分析
3.3 结果与分析
3.3.1 菌株形态观察
3.3.2 生长曲线测定结果
3.3.3 致病力测定结果
3.3.4 多糖含量测定
3.3.5 生物膜形成能力测定
3.3.6 运动性测定
3.3.7 黏附能力测定
3.4 讨论
3.5 小结
第4章糖基转移酶蛋白纯化、酶活测定及蛋白互作分析
4.1 试验材料
4.1.1 供试菌株
4.1.2 试验试剂
4.1.3 试验仪器
4.1.4 涉及引物
4.1.5 培养基及主要溶液配置
4.2 试验方法
4.2.1 pGEX-wbnH2载体构建
4.2.2 重组蛋白小量表达筛选
4.2.3 重组蛋白大量表达及纯化
4.2.4 糖基转移酶蛋白活性测定
4.2.5 GST pull down
4.2.6 Western Blot分析
4.3 结果与分析
4.3.1 pGEX-wbnH2载体构建结果
4.3.2 重组蛋白小量表达筛选结果
4.3.3 重组蛋白大量表达及纯化结果
4.3.4 糖基转移酶蛋白活性测定
4.3.5 GST pull down
4.4 讨论
4.5 小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文和参加科研情况
致谢
作者简介