去甲斑蝥素含氟衍生物的合成以及抗肝癌活性的研究
目的：将含氟基团引入去甲基斑蝥素羧酸苄酯骨架之中，设计并合成出抗肿瘤活性更好的斑蝥素衍生物。 方法：以马来酸酐（1）和呋喃（2）为起始原料，首先合成5-烯去甲基斑蝥素化合物中间体（3）。随后化合物（3）在Pd/C催化还原下，生成去甲基斑蝥素中间体（4），化合物（4）在4-二甲氨基吡啶（DMAP）作用下，与各种类型的含氟苄醇反应，合成一系列的含氟去甲基斑蝥衍生物，并使用核磁共振（NMR）和高分辨质谱（HRMS）进行表征。采用去甲基斑蝥素酸钠（NCTD-Na）作为标准对照，对合成的18个化合物进行实验。通过CCK-8法检测18个化合物和NCTD-Na对人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞的增殖抑制率。通过流式细胞术检测经过目标化合物、NCTD-Na处理以后的人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞的周期变化以及细胞凋亡率。通过Transwell实验观察目标化合物、NCTD-Na对人肝癌SMMC-7721细胞迁移抑制的影响。 结果：成功合成含氟去甲基斑蝥素羧酸苄酯衍生物17个（6a-6q）和去甲基斑蝥素羧酸苄酯衍生物1个（6r）。结果显示：化合物6m对人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞的增殖抑制作用较强，人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞，在化合物6m、NCTD-Na作用24h后药物对细胞的IC50分别为：4.37、4.23、3.45μmol/L；17.12、18.35、21.02μmol/L；48h后药物对细胞的IC50分别为：3.93、3.39、2.16μmol/L；16.38、16.23、19.17μmol/L。其余化合物对人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞具有不同程度的增殖抑制作用。使用流式细胞术检测细胞的凋亡结果：随着化合物6m(终浓度为2、4、8μmol/L)、NCTD-Na(终浓度为10、20、40μmol/L)的浓度升高，人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞的凋亡率增加。流式细胞术检测细胞的周期结果：随着化合物6m(终浓度为2、4、8μmol/L)、NCTD-Na(终浓度为10、20、40μmol/L)浓度的升高，人肝癌SMMC-7721、Bel-7402和人肝LO2细胞的G0/G1期细胞百分数比例下降，S期细胞百分数比例未见明显变化，G2/M期细胞百分数比例增加，出现G2/M期阻滞。Transwel实验结果显示，人肝癌SMMC-7721细胞随着化合物6m(终浓度为2、4、8μmol/L)、NCTD-Na(终浓度为10、20、40μmol/L)的浓度升高，细胞的迁移数目明显减少。 结论： 1、新设计合成的17个含氟去甲基斑蝥素羧酸苄酯衍生物均为首次合成，其中化合物6m较NCTD-Na的细胞毒作用更为显著，化合物6m结构中苯环上3，5位氟取代可能是增加化合物细胞毒性的关键位点。 2、化合物6m够抑制人肝癌SMMC-7721和Bel-7402细胞的增殖，可以诱导人肝癌SMMC-7721和Bel-7402细胞的凋亡，能够抑制人肝癌SMMC-7721细胞的迁移。
去甲基斑蝥素衍生物;有机氟化学;化学合成;抗肝癌活性
遵义医科大学
硕士
病原生物学
李晓飞;贺春阳
2020
中文
R284
2023-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）