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主要符号对照表
第一章绪论
1.1 CRISPR-Cas12a系统与重组酶介导扩增技术（RAA）研究概述
1.1.1 CRISPR-Cas12a系统
1.1.2 CRISPR-Cas12a检测
1.1.3 CRISPR-Cas检测的优点
1.1.4重组酶介导扩增技术（Recombinase-aided amplification，RAA）
1.1.5 以RAA技术为基础的衍生技术及其应用
1.2 弓形虫与犬弓首蛔虫简介
1.2.1 弓形虫
1.2.2 犬弓首蛔虫
1.3 环境中弓形虫与犬弓首蛔虫检测方法
1.3.1 显微检测技术
1.3.2 分子生物学检测技术
1.4 研究目的及意义
第二章弓形虫RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的建立及初步应用
2.1 实验材料
2.1.1 病原虫株
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 弓形虫RAA方法的建立
2.2.2 弓形虫阳性重组质粒pMD18-T-529 bp的构建
2.2.3 弓形虫CRISPR-Cas12a荧光检测系统的构建
2.2.4 弓形虫RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的构建
2.3 实验结果
2.3.1 RAA反应条件优化
2.3.2 crRNA的优化筛选
2.3.3 Cas12a蛋白浓度的优化筛选
2.3.4 RAA-CRISPR/Cas12a方法的敏感性分析
2.3.5 RAA-CRISPR/Cas12a方法的特异性分析
2.3.6 RAA-CRISPR/Cas12a方法的保守性分析
2.3.7 环境样品的检测
2.4 讨论
第三章犬弓首蛔虫RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的建立及初步应用
3.1 实验材料
3.1.1 病原虫株
3.1.2 实验试剂
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 弓首蛔虫RAA方法的建立
3.2.2 弓形虫阳性重组质粒pMD18-T-RP1的构建
3.2.3 犬弓首蛔虫CRISPR-Cas12a荧光检测系统的构建
3.2.4 犬弓首蛔虫RAA-CRISPR/Cas12a检测方法的构建
3.2.5 环境土壤样品的检测
3.3 实验结果
3.3.1 RAA反应条件优化
3.3.2 crRNA的优化筛选
3.3.3 Cas12a蛋白浓度的优化
3.3.4 RAA-CRISPR/Cas12a方法的敏感性分析
3.3.5 RAA-CRISPR/Cas12a方法的特异性分析
3.3.6 环境样品的检测
3.4 讨论
第四章全文结论
参考文献
致谢
作者简历