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第一章绪论
1.2 CRISPR/Cas13系统的研究概述
1.2.2 CRISPR/Cas13系统在检测中的应用
1.2.3 CRISPR/Cas系统在活细胞DNA/RNA示踪中的应用
1.3 DNA纳米材料的概述
1.3.2四面体DNA功能化纳米材料
1.4.2植物miRNA抗病毒功能研究进展
1.5本文研究意义
第二章基于CRISPR/Cas13a的TSWV检测技术建立
2.2.1 TSWV核衣壳蛋白N的表达载体构建
2.2.2重组酶聚合酶等温扩增反应(RPA)
2.2.3 Cas13a蛋白的提纯
2.2.4 crRNA的体外制备
2.2.5基于CRISPR/Cas13a的病毒检测方法建立
2.3结果与分析
2.3.3基于CRISPR/Cas13a病毒检测灵敏度分析
2.3.4基于CRISPR/Cas13a的病毒检测特异性分析
2.3.5基于CRISPR/Cas13a病毒检测在在应用中的可靠性
2.4讨论
第三章基于CRISPR/Cas13a的TSWV RNA示踪技术建立
3.2.1密码子优化的BirA表达载体构建
3.2.2 TSWV核衣壳蛋白N表达载体构建
3.3结果与分析
3.3.3 TSWV核衣壳蛋白N表达载体构建
3.3.5初步构建基于CRISPR/dCas13的RNA示踪体系
3.4讨论
第四章DNA纳米结构递送的抗病毒miRNA药物制备
4.2.2 DNA纳米材料的表征
4.2.3转录组的建库及测序
4.2.4本氏烟miR159的靶基因预测
4.2.5 Quantitative Real-time PCR
4.3结果与分析
4.3.1 DNA纳米材料表征结果
4.3.2转录组的建库及测序数据质量评估
4.3.3差异表达基因的功能注释与富集分析
4.3.4本氏烟miR159靶基因预测结果
4.3.6浸润TDN-miR159对TSWV的抗病毒分析
4.4讨论
第五章全文结论
5.2本文创新点
参考文献
致谢
作者简历