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主要符号对照表
第一章绪论
1.1 病原学
1.1.1病原命名与血清型
1.1.2病原特性
1.1.3临床特征
1.1.4 毒力因子
1.2 Ⅸ型分泌系统
1.2.1 Ⅸ型分泌系统的发现
1.2.2 Ⅸ型分泌系统的组成
1.2.3 Ⅸ型分泌系统结构
1.2.4 Ⅸ型分泌系统功能
1.3 细菌蛋白酶
1.3.1 细菌蛋白酶的功能
1.3.2 类枯草杆菌蛋白酶（subtilisin-like serine proteases, Subtilases）
1.4 细菌性脑膜炎
第二章鸭疫里默氏杆菌T9SS效应分子的鉴定
2.1 材料
2.1.1 试验用菌株和质粒
2.1.2 试验用仪器
2.1.3 试验用耗材和化学试剂
2.1.4 试验用培养基和缓冲液
2.1.5 试验用动物品系和抗生素浓度
2.2 方法
2.2.1生物信息学分析预测RA T9SS效应分子
2.2.2 RA T9SS效应分子的原核表达和纯化
2.2.3 RA T9SS效应分子多抗血清的制备
2.2.4 RA T9SS效应分子分泌特性研究
2.2.5 RA T9SS效应分子转录水平验证
2.2.6 RA T9SS效应分子基因缺失株的构建
2.2.7效应分子基因缺失株半数致死量（median lethal dose, LD50）的测定
2.2.8 RA T9SS效应分子基因缺失株蛋白酶活性测定
2.2.9 数据统计分析
2.3 结果
2.3.1 RA T9SS效应分子生物信息学分析
2.3.2 RA T9SS效应分子的原核表达和纯化
2.3.3 RA T9SS组分基因gldM缺失影响效应分子的分泌
2.3.4 RA T9SS组分基因gldM缺失不影响效应分子的转录
2.3.5 RA T9SS效应分子基因缺失株的构建
2.3.6 RA T9SS效应分子基因缺失株蛋白酶活性测定
2.4 讨论
第三章 RA T9SS效应分子AS87_RS04190 (SspA) 的功能鉴定
3.1 材料
3.1.1 试验用菌株和质粒
3.1.2 试验用仪器
3.1.3 试验用耗材和化学试剂
3.1.4试验用培养基和缓冲液
3.1.5试验用抗生素和试验动物
3.1.6引物名称和序列
3.2 方法
3.2.1 效应分子AS87_RS04190生物信息学分析
3.2.2 回复株cYb2ΔsspA的构建和LD50测定
3.2.3 效应分子SspA的表达鉴定
3.2.4 粘附入侵能力测定
3.2.5血液载菌量的测定
3.2.6血清敏感性的测定
3.2.7生长曲线测定
3.2.8蛋白分泌以及蛋白酶活性测定
3.2.9 重组蛋白rSspA的表达和纯化
3.2.10酶促反应最佳pH和温度的测定
3.2.11金属离子对酶活性影响的测定
3.2.12酶促反应Km和Vmax的测定
3.2.13明胶酶活性测定
3.2.14纤维蛋白原降解试验
3.2.15抗菌肽（LL-37）降解试验
3.2.16抗菌肽（LL-37）杀菌活性试验
3.2.17 rSspA活性位点分析
3.2.18 数据统计分析
3.3 结果
3.3.1 效应分子SspA结构域预测
3.3.2 cYb2ΔsspA恢复表达SspA和雏鸭致死能力
3.3.3缺失基因sspA影响RA的致病能力和血清敏感性
3.3.4 缺失基因sspA影响RA的粘附入侵能力
3.3.5缺失基因sspA对细菌生长、蛋白质分泌和蛋白酶活性的影响
3.3.6 rSspA酶的特性
3.3.7 RA SspA具有明胶酶活性
3.3.8 RA SspA具有降解纤维蛋白原活性
3.3.9 RA SspA降解抗菌肽LL-37增加细菌存活
3.3.10 Asp126、His158和Ser410是RA SspA的酶活性位点
3.4 讨论
第四章 RA 利用SspA穿越血脑屏障的机制研究
4.1 材料
4.1.1 试验用菌株和质粒
4.1.2 试验用仪器
4.1.3 试验用耗材和化学试剂
4.1.4 试验用抗体
4.1.5 细胞、试验动物和引物
4.2 方法
4.2.1感染鸭脑内菌量测定
4.2.2 RA粘附入侵bEnd.3细胞能力的测定
4.2.3 RA穿越体外BBB模型能力测定
4.2.4 紧密连接蛋白免疫印迹分析
4.2.5 紧密连接蛋白免疫荧光分析
4.2.6 紧密连接蛋白转录水平检测
4.2.7 真核表达质粒构建
4.2.8 SspA、Claudin-5和Occludin的真核表达
4.2.9 SspA水解Occludin试验
4.2.10 SspA水解Claudin-5试验
4.2.11 SspA水解IV型胶原蛋白（Type IV collagens）试验
4.2.12 数据分析
4.3 结果
4.3.1 脑细菌载量
4.3.2粘附入侵bEnd.3细胞能力的测定
4.3.3 RA穿越体外BBB模型能力测定
4.3.4 紧密连接及基底膜蛋白变化
4.3.5 紧密连接及基底膜蛋白免疫荧光强度变化
4.3.6 紧密连接及基底膜蛋白转录水平变化
4.3.7 SspA、Claudin-5和Occludin的真核表达
4.3.8 SspA水解Occludin
4.3.9 SspA水解Claudin-5
4.3.10 SspA水解IV型胶原蛋白（Type IV collagens）
4.4 讨论
第五章结论
参考文献
附录A
致谢
作者简历