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玉米籽粒发育基因ABP7的转基因小麦系的分子和生理分析

Zaid Chachar
中国农业科学院
引用
小麦(TriticumaestivumL.)是世界上主要的粮食作物。随着人口数量的快速增长,实现小麦等作物的产量最大化至关重要。粒重是决定作物籽粒产量的重要因子,与粒大小(包括粒长和粒宽)正相关。本实验室前期工作证明ABP7基因编码结合G-box的bHLH类转录激活子,其在拟南芥和玉米中过表达显著增加转基因株系的籽粒大小和粒重。为创制能够提高产量的小麦新品系,本实验室建构了ABP7基因表达载体并转化小麦,获得了多个独立再生植株的T1种子。  本研究的目的是通过分子鉴定获得表达ABP7基因的纯合转基因小麦株系,并对其产量相关生长发育表型如粒大小、粒数和粒重等进行重点分析。为此,对种植于温室和大田的小麦转化株系进行了免疫试纸条、PCR、Southern分子杂交和qPCR分析,并做了2018和2019两年的表型鉴定和相关生理分析,获得实验结果如下:  1.通过免疫试纸条和PCR分析,获得了多个纯合转基因小麦株系,包括HB123-1-3-2,HB123-3-6-3和HB123-5-10-8(表达PABP7-ABP7建构,CB037遗传背景);HB287-2-18-14,HB287-5-27-9和HB287-15-25-6(表达Pubi-ABP7建构,Fielder遗传背景);QB205-1-3-3,QB205-3-13-5和QB205-5-14-3(表达PABP7-ABP7建构,Fielder遗传背景)。  2.Southern分子杂交结果显示,ABP7基因已插入转基因小麦基因组,其中HB123-1-3-2和HB287-15-25-6株系均含有多个拷贝的基因插入,而QB205-1-3-3株系为单拷贝转化事件。  3.实时定量PCR分析表明,HB123-1-3-2和HB287-15-25-6两个株系中ABP7基因的表达显著(p<0.05)高于各自的对照。QB205-1-3-3株系中ABP7基因的表达与对照无显著差异(p<0.05)。  4.HB123-1-3-2和HB287-15-25-6两个株系的产量相关指标,包括穗粒数、千粒重、穗粒重、粒长和粒宽等,均比对照显著提高(p<0.05)。这些指标于2018冬和2019夏两个生长季在这两个株系中获得一致的鉴定结果。对于QB205-1-3-3株系而言,穗粒数、千粒重、穗粒重和粒宽等性状指标在2018年冬季进行的T3代鉴定中均比对照有显著提高(p<0.05);但是在2019夏季对T4代进行的鉴定中,所有测试的产量相关指标均与对照无显著差异(p<0.05),尽管数值有稍许增加。  5.HB123-1-3-2和HB287-15-25-6两个株系中总叶绿素、叶绿素a和叶绿素b含量均比对照显著提高(p<0.05)。QB205-1-3-3株系与对照比,其叶绿素含量无显著差异(p<0.05),尽管数值有稍许增加。  6.HB123-1-3-2和HB287-15-25-6两个株系中,总可容糖含量均比对照提高了4倍以上,QB205-1-3-3中总可容糖含量与对照比也显著提高(p<0.05),但提高幅度不如HB123-1-3-2和HB287-15-25-6两个株系的高。  上述结果表明,通过本研究鉴定获得了产量相关性状显著改善的表达ABP7基因的转基因小麦株系,为小麦高产育种提供了有价值的种质资源。

小麦;转基因株系;ABP7基因;产量相关性状;种质资源

中国农业科学院

博士

生物化学与分子生物学

赵军

2022

中文

S512.1

2023-07-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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