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1 引言
1.1 植物磷代谢研究进展
1.1.1 植物磷的吸收
1.1.2 植物磷的转运
1.1.3 植物磷的积累
1.1.4 植物中液泡膜磷酸盐转运体SPX-MFS 家族的功能
1.1.5 植物中液泡磷酸盐外排转运体VPE 的功能
1.2 植物SNARE蛋白家族
1.2.1 植物SNARE 蛋白的结构与分类
1.2.2 植物SNARE 蛋白在生长发育中的作用
1.2.3 植物SNARE 蛋白在生物与非生物胁迫响应中的作用
1.3 植物学中蛋白相互作用主要研究方法
1.3.1 酵母双杂交（Y2H，MYTH）
1.3.2 双分子荧光互补（BiFC）和荧光能量共振转移（FRET）
1.3.3 表面等离子共振分析（SPR）
1.3.5 蛋白质相互作用高通量筛选新系统（CrY2H-seq）
1.4 本研究的目的意义及主要内容
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 试验方法
2.2.1 植物生长条件和培养方法
2.2.2 载体构建
2.2.3 植物RNA提取、cDNA的合成和实时荧光定量PCR
2.2.4 磷酸盐浓度和总磷含量的测定
2.2.5 质子解耦 31P核磁共振光谱技术（31P-NMR）测定液泡Pi含量
2.2.6 水稻木质部汁液的收集
2.2.7 磷酸盐吸收活性测定
2.2.8 农杆菌注射法分析目的蛋白在烟草中的亚细胞定位
2.2.9 水稻原生质体制备及转化
2.2.10 分裂泛素的酵母双杂交实验
2.2.11 利用分裂泛素的酵母双杂体系进行cDNA文库构建与互作蛋白筛选
2.2.12 BiFC实验
2.2.13 生物信息学分析
3 液泡磷转运体OsSPX-MFS家族调控水稻磷稳态的生理功能
3.1 OsSPX-MFS遗传材料的创制
3.2 水稻SPX-MFS家族表达分析
3.3 水稻SPX-MFS1~3为液泡磷酸盐内流转运体
3.4 液泡磷酸盐内流转运体的突变改变了水稻中磷酸盐的组织分布
3.5 穗部磷酸盐的大量积累影响水稻生殖发育
3.6 osspx-mfs突变体提高对低磷的耐受能力
3.7 osspx-mfs突变体提高水稻PUE
3.8 小结和讨论
4 液泡磷转运体OsSPX-MFS家族的分子调控机制
4.1 低磷抑制OsSPX-MFS液泡膜定位
4.2 OsSPX-MFS3互作蛋白筛选
4.3 OsSPX-MFS与候选互作蛋白的互作验证
4.4 OsSPX-MFS与OsSYP候选互作蛋白的共定位分析
4.5 互作候选蛋白OsSYP2家族的表达分析
4.6 候选互作蛋白OsSYP21/22遗传材料创制
4.7 OsSYP22表达异常影响OsSPX-MFS3的亚细胞定位
4.8 小结和讨论
5 结论与展望
5.1 液泡磷转运体OsSPX-MFS家族调控水稻磷稳态的生理功能
5.2 液泡磷转运体OsSPX-MFS家族的分子调控机制
参考文献
附录