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目录
引言
1 实验材料
1.1实验动物
1.2实验仪器
1.3实验试剂和生产厂家
1.4溶液配制表
2 实验方法
2.1细胞培养
2.2细胞活力检测
2.3 LDH检测
2.4 FDA/PI双重染色
2.5荧光定量PCR检测目的基因相对表达水平
2.6 Western blot检测目的蛋白表达水平
2.7免疫荧光
2.8 ShRNA瞬时转染
2.9流式细胞仪检测细胞凋亡
2.10分子对接
2.11 ELISA检测
2.12动物模型建立与分组
2.13行为学评分
2.14 De Ryck’s行为测试
2.15 TTC染色
2.16数据分析与统计
3 实验结果
3.1 IAA分别以浓度和时间依赖性方式诱导HT22细胞死亡
3.2伊文思蓝阻止IAA诱导的HT22细胞死亡
3.3 P2X4R在HT22细胞高表达
3.4伊文思蓝阻止IAA诱导的P2X4R表达增加
3.5抑制P2X4R/p38信号通路可产生对抗IAA的神经保护活性
3.6 P2X4R ShRNA和伊文思蓝均可阻止IAA诱导的HT22细胞凋亡
3.7分子对接实验显示P2X4R和伊文思蓝可能存在直接相互作用
3.8伊文思蓝预处理改善MCAO诱导的大鼠神经功能和行为评分下降及梗死面积增加
3.9术后伊文思蓝处理无法改善MCAO诱导的大鼠神经功能和行为评分下降及梗死面积增加
4 讨论
5 总结
参考文献
附录A 缩略词
附录B 综述:岩藻黄素对抗神经退行性疾病的潜在机制
在学研究成果
致谢