原花青素B2抗衰老作用与代谢产物分析鉴定的研究
原花青素提取物具有较强的抗氧化活性,近年来已引起众多学者的广泛关注。原花青素B2是火龙果、葡萄籽、沙棘果、蓝莓等食品资源中花青素主要活性成分。目前鲜有原花青素B2的体内代谢产物鉴定及其组织分布的相关研究报道。本文通过建立D-半乳糖衰老小鼠模型,采用抗氧化表征与学习记忆表征的评价方式,探究原花青素B2干预对抗衰老作用的影响,并通过UPLC-DAD-ESI-IT-TOF技术探究原花青素B2在小鼠体内可能代谢产物形式及其组织分布,推测其可能的代谢路径。研究结果如下: (1)通过建立D-半乳糖诱导衰老小鼠模型,测定小鼠抗氧化表征,学习记忆能力表征探究原花青素B2对小鼠抗衰老作用的影响,结果表明:原花青素B2干预组小鼠体重增大,肝、脑、心等脏器指数与衰老组小鼠相比显著升高 (Plt;0.05),小鼠肝,肾脏,脑组织中的SOD、CAT、T-AOC、GSH-PX活力显著升高(Plt;0.05),MDA含量显著减少(Plt;0.05),原花青素B2干预可完全或部分恢复上述指标至对照组水平。在旷场试验中,与对照组相比,衰老组小鼠在迷宫中活动总路程、进入中心区域次数、在中心区域停留总时间和总路程均显著降低(Plt;0.05),原花青素B2组小鼠与衰老组相比在迷宫中活动总路程、进入中心区域次数、在中心区域停留总时间与总路程显著提高(Plt;0.05)。在Y迷宫试验中,衰老组小鼠迷宫中停留总时间低于对照组(Plt;0.05),潜伏期显著高于对照组(Plt;0.05)。原花青素B2组小鼠与衰老组小鼠相比在食物臂停留时间提高,但无显著性差异,潜伏期显著降低(Plt;0.05)。在水迷宫试验中,衰老组小鼠登上逃生平台的潜伏期显著高于对照组小鼠(Plt;0.05),穿越逃生平台次数、平台象限停留总时间与总路程均显著低于对照组小鼠(Plt;0.05)。原花青素B2组小鼠与衰老组小鼠相比登上逃生平台潜伏期显著降低(Plt;0.05),穿越平台次数、平台象限停留总时间与总路程显著升高(Plt;0.05)。表明原花青素B2对衰老造成小鼠抗氧化能力,学习记忆能力的降低具有一定的改善作用,且基本恢复至正常水平。 (2)通过原花青素B2灌胃小鼠(800mg/kg体重),分析血浆与尿液中原花青素B2可能代谢产物,鉴定45种原花青素B2代谢产物(其中有16种新的代谢产物),包括32种磺酸化代谢产物、14种甲基化产物、7种水合反应产物、2种羟基化产物、3种葡糖苷酸化产物、2种羟基化产物、1种还原产物。其中原花青素B2黄烷键(4β→8)断裂的代谢产物有27种,包括芳香酸产物(16种)、结合型产物(25种)、C环裂解产物(3种)、苯戊内酯产物(2种);原花青素B2结合型代谢产物有18种,包括磺酸化产物(9种)、甲基化产物(11种)、葡糖甘酸化产物(1种)、水合产物(6种)、羟基化产物(2种)、还原产物(1种),表明原花青素B2在小鼠体内代谢形式复杂多样。 (3)采用UPLC-DAD-ESI-IT-TOF技术分析原花青素B2代谢产物在小鼠组织中分布并推测其可能的代谢途径,结果表明:在肝、小肠、肾、肺、心、脑和脾等组织器官中检测原花青素B2代谢产物的种类分别为9、18、5、3、11、1、3,表明原花青素B2代谢产物在小鼠体内分布广泛。肝组织中检出代谢产物均为原花青素B2的结合型(Mr>577.13)。表儿茶素单体仅在小肠组织中被检出。在小鼠尿液中发现36种原花青素B2代谢产物,其中25种代谢产物为原花青素B2磺烷键断裂产物,11种为原花青素B2结合型产物,表明原花青素B2一部分被直接吸收进入肝脏代谢,一部分亦可通过肠道微生物分解为小分子后被吸收,且主要通过尿液途径排泄。 原花青素B2具有较强的抗氧化活性,能明显干预衰老小鼠体内氧化应激,原花青素B2在小鼠体内代谢产物种类复杂多样,且广泛分布于小鼠组织。其抗氧化活性可能是通过其代谢产物在组织的分布发挥作用,从而改善衰老小鼠的学习记忆能力。
原花青素B2;代谢产物;组织分布;抗衰老作用;抗氧化活性
上海应用技术大学
硕士
生物化工
肖瀛
2017
中文
R151
2021-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)