原花青素B2抗衰老作用与代谢产物分析鉴定的研究
原花青素提取物具有较强的抗氧化活性，近年来已引起众多学者的广泛关注。原花青素B2是火龙果、葡萄籽、沙棘果、蓝莓等食品资源中花青素主要活性成分。目前鲜有原花青素B2的体内代谢产物鉴定及其组织分布的相关研究报道。本文通过建立D-半乳糖衰老小鼠模型，采用抗氧化表征与学习记忆表征的评价方式，探究原花青素B2干预对抗衰老作用的影响,并通过UPLC-DAD-ESI-IT-TOF技术探究原花青素B2在小鼠体内可能代谢产物形式及其组织分布,推测其可能的代谢路径。研究结果如下： （1）通过建立D-半乳糖诱导衰老小鼠模型，测定小鼠抗氧化表征，学习记忆能力表征探究原花青素B2对小鼠抗衰老作用的影响，结果表明：原花青素B2干预组小鼠体重增大，肝、脑、心等脏器指数与衰老组小鼠相比显著升高 （Plt;0.05），小鼠肝，肾脏，脑组织中的SOD、CAT、T-AOC、GSH-PX活力显著升高（Plt;0.05），MDA含量显著减少（Plt;0.05），原花青素B2干预可完全或部分恢复上述指标至对照组水平。在旷场试验中，与对照组相比，衰老组小鼠在迷宫中活动总路程、进入中心区域次数、在中心区域停留总时间和总路程均显著降低（Plt;0.05），原花青素B2组小鼠与衰老组相比在迷宫中活动总路程、进入中心区域次数、在中心区域停留总时间与总路程显著提高（Plt;0.05）。在Y迷宫试验中,衰老组小鼠迷宫中停留总时间低于对照组（Plt;0.05），潜伏期显著高于对照组（Plt;0.05）。原花青素B2组小鼠与衰老组小鼠相比在食物臂停留时间提高，但无显著性差异，潜伏期显著降低（Plt;0.05）。在水迷宫试验中，衰老组小鼠登上逃生平台的潜伏期显著高于对照组小鼠（Plt;0.05），穿越逃生平台次数、平台象限停留总时间与总路程均显著低于对照组小鼠（Plt;0.05）。原花青素B2组小鼠与衰老组小鼠相比登上逃生平台潜伏期显著降低（Plt;0.05），穿越平台次数、平台象限停留总时间与总路程显著升高（Plt;0.05）。表明原花青素B2对衰老造成小鼠抗氧化能力，学习记忆能力的降低具有一定的改善作用，且基本恢复至正常水平。 （2）通过原花青素B2灌胃小鼠（800mg/kg体重），分析血浆与尿液中原花青素B2可能代谢产物，鉴定45种原花青素B2代谢产物（其中有16种新的代谢产物），包括32种磺酸化代谢产物、14种甲基化产物、7种水合反应产物、2种羟基化产物、3种葡糖苷酸化产物、2种羟基化产物、1种还原产物。其中原花青素B2黄烷键（4β→8）断裂的代谢产物有27种，包括芳香酸产物（16种）、结合型产物（25种）、C环裂解产物（3种）、苯戊内酯产物（2种）；原花青素B2结合型代谢产物有18种，包括磺酸化产物（9种）、甲基化产物（11种）、葡糖甘酸化产物（1种）、水合产物(6种)、羟基化产物（2种）、还原产物（1种），表明原花青素B2在小鼠体内代谢形式复杂多样。 （3）采用UPLC-DAD-ESI-IT-TOF技术分析原花青素B2代谢产物在小鼠组织中分布并推测其可能的代谢途径，结果表明：在肝、小肠、肾、肺、心、脑和脾等组织器官中检测原花青素B2代谢产物的种类分别为9、18、5、3、11、1、3，表明原花青素B2代谢产物在小鼠体内分布广泛。肝组织中检出代谢产物均为原花青素B2的结合型（Mr＞577.13）。表儿茶素单体仅在小肠组织中被检出。在小鼠尿液中发现36种原花青素B2代谢产物，其中25种代谢产物为原花青素B2磺烷键断裂产物，11种为原花青素B2结合型产物，表明原花青素B2一部分被直接吸收进入肝脏代谢，一部分亦可通过肠道微生物分解为小分子后被吸收，且主要通过尿液途径排泄。 原花青素B2具有较强的抗氧化活性，能明显干预衰老小鼠体内氧化应激，原花青素B2在小鼠体内代谢产物种类复杂多样，且广泛分布于小鼠组织。其抗氧化活性可能是通过其代谢产物在组织的分布发挥作用，从而改善衰老小鼠的学习记忆能力。
原花青素B2;代谢产物;组织分布;抗衰老作用;抗氧化活性
上海应用技术大学
硕士
生物化工
肖瀛
2017
中文
R151
2021-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）